细胞周期相关基因的胶质母细胞瘤预后模型构建及RFC2的细胞增殖效应研究

摘要

目的 研究复制因子C亚基2(RFC2)与胶质母细胞瘤(GBM)患者预后和肿瘤细胞增殖之间的关系，并探索其在GBM发展中的潜在分子通路。方法 利用生物信息学方法，筛选出可作为GBM独立预后因素的细胞周期基因，结合临床指标，构建GBM患者风险评分模型并验证其预测能力，对目标基因RFC2进行GO、KEGG和GSEA分析。取对数生长期的U87 GBM细胞进行慢病毒转染后分组(空白对照组、shRFC2#1、shRFC2#2),通过qRT-PCR、Western blotting、Edu染色、克隆形成实验检测mRNA表达、蛋白表达和细胞增殖。结果 RFC2在GBM中表达上调，并随着胶质瘤病理级别升高，呈明显上升趋势。基因功能与通路分析结果提示，RFC2在姐妹染色体分离、染色体分离、细胞器裂变、核分裂、核有丝分裂等进程中，促进细胞周期过程中G1向S期转变。qRT-PCR和Western blotting结果显示，相较空白对照组，慢病毒敲低组中转录mRNA减少(P<0.000 1)、翻译蛋白量减少；同样，与空白对照组相比，慢病毒敲低组Edu染色阳性率降低(P<0.000 1),集落形成能力相应降低(P<0.001)。结论 RFC2在GBM中高表达，且与胶质瘤分级和患者不良预后相关，促进GBM细胞增殖；RFC2有可能成为GBM潜在的生物标志物和治疗靶标。

关键词

胶质母细胞瘤(GBM) / 复制因子C亚基2(RFC2) / 预后 / 增殖

基金资助

陕西省自然科学基金青年项目(No.2022JQ-810);陕西省自然科学基金面上项目(No.2021JM-264)