乙酰化STAT3诱导的DIRAS2缺失促进三阴性乳腺癌细胞的增殖

摘要

目的 探讨乙酰化STAT3对DIRAS2基因表达的调控及其在三阴性乳腺癌(triple-negative breast cancer, TNBC)细胞增殖中的作用。方法 通过数据库查询、Western blotting和qRT-PCR分析TNBC组织和细胞中DIRAS2和乙酰化STAT3的表达水平。选取TNBC细胞系MDA-MB-231和SUM159,通过慢病毒或质粒构建DIRAS2过表达及STAT3野生或Lys685位点突变的细胞株。利用CCK-8实验评估DIRAS2和STAT3乙酰化对TNBC细胞增殖的影响。应用Western blotting、焦磷酸测序、ChIP和IP技术研究乙酰化STAT3对DIRAS2表达的调控作用及机制。结果 DIRAS2在TNBC组织和细胞中表达较低。焦磷酸测序分析发现，与正常乳腺上皮细胞相比，TNBC细胞中DIRAS2启动子区域的CpG岛甲基化水平升高，并促进癌细胞增殖。此外，TNBC细胞中STAT3的乙酰化程度增加，而DIRAS2启动子甲基化状态随着STAT3乙酰化的增加而发生改变。ChIP和IP实验表明，乙酰化STAT3可与DIRAS2启动子结合，而STAT3 Lys685位点突变会破坏STAT3与DNMT1的相互作用。结论 在TNBC中，乙酰化STAT3通过招募DNMT1诱导DIRAS2基因启动子甲基化，从而导致DIRAS2表达缺失和癌细胞增殖。

关键词

三阴性乳腺癌(TNBC) / 乙酰化STAT3 / DIRAS2 / 甲基化 / 增殖

基金资助

国家自然科学基金资助项目(No.81972473)