胃肠道解痉药匹维溴铵对表皮葡萄球菌的体外和体内抗菌活性研究

摘要

目的 研究匹维溴铵（PVB）对表皮葡萄球菌（表葡）的体外和体内抗菌活性。方法 收集长沙市某医院2022年1—12月住院患者血液分离的表葡。采用微量肉汤稀释试验和纸片扩散法检测表葡对PVB的敏感性，通过时间—杀菌曲线检测PVB抗菌效果的时间和浓度依赖性，透射电镜观察PVB处理后细菌的超微结构改变，结晶紫染色试验检测PVB对表葡生物膜的抑制和清除效果，采用棋盘稀释法研究PVB与抗菌药物的联合抗菌效果。构建皮肤脓肿感染模型，检测PVB的体内抗菌活性。结果 药敏试验结果显示，PVB对表葡标准菌株RP62A、ATCC 12228的最低抑菌浓度（MIC）、最低杀菌浓度（MBC）均分别为8、16μg/mL;对表葡临床菌株的MIC、MBC分别为4～8μg/mL、8～16μg/mL。纸片扩散法结果显示，与未加药的对照组（0.60±0） cm相比，0.2 mg PVB出现明显抑菌圈[（2.26±0.09）cm;t=45.34,P<0.001],且抑菌圈直径随着PVB药量增加而增大。时间—杀菌曲线结果提示，PVB具有杀菌活性，且随着药物浓度和作用时间的增加而增强。透射电镜观察发现PVB可明显破坏表葡的正常结构，导致细菌水肿和裂解。此外，1×MIC的PVB还可显著抑制表葡生物膜的形成，使其生物膜的形成量(A_{570 nm})从（2.30±0.18）减少到（0.47±0.11;t=14.85,P<0.001）。同时，1×MIC的PVB还可有效破坏已形成的生物膜，使生物膜的量从（2.64±0.10）减少到（1.77±0.30;t=4.76,P=0.009）。PVB与阿米卡星和庆大霉素联用具有协同抗菌活性，其协同抑菌指数分别为0.50、0.31。动物模型发现10 mg/kg体重的PVB可使脓肿面积从（68.83±10.68） mm²减少到（35.50±10.58） mm²（t=6.52,P<0.001）,且使脓肿中的活菌量从（6.11±0.55）lg （CFU/脓肿）减少到（3.60±0.34）lg （CFU/脓肿）(t=3.08,P=0.014)。苏木精-伊红染色发现PVB用药组皮肤脓肿中的炎性细胞浸润相比对照组明显减少，趋于正常。结论 PVB对表葡具有明显的体外和体内抗菌活性，有望成为表葡相关感染的替代治疗途径。

关键词

匹维溴铵 / 药物重利用 / 表皮葡萄球菌 / 生物膜 / 脓肿感染模型 / 抗菌活性