穿心莲内酯减轻脂多糖诱导的肾小管上皮细胞铁死亡机制

摘要

目的 探讨穿心莲内酯(AG)对脂多糖(LPS)诱导的脓毒症肾小管上皮细胞(HK-2细胞)铁死亡的影响及其作用机制。方法 采用LPS处理HK-2细胞，模拟脓毒症HK-2损伤体外模型，进一步用5、10、20、40μmol/L的AG进行干预，将细胞随机分为对照组(Control)、LPS组、LPS+二甲亚砜(DMSO)组、AG组。采用CCK-8法检测细胞活力，筛选出最适LPS和AG浓度；比较各组中细胞形态变化，肾损伤标志物中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)和肾损伤分子-1(KIM-1)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)和活性氧(ROS)水平，以及铁死亡调控蛋白溶质载体家族7成员11(SLC7A11)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)和铁蛋白(Ferritin)的表达水平，评估AG处理对细胞的保护作用。结果 与Control组相比，10μg/mL LPS诱导的HK-2细胞中细胞活力及GSH含量下降，细胞皱缩、贴壁能力差，氧化产物MDA和ROS含量以及肾损伤标志物NGAL和KIM-1水平明显升高，SLC7A11、GPX4蛋白表达水平降低，Ferritin蛋白表达水平增高，差异均有统计学意义(均P<0.05)。而在使用AG干预后，与LPS组相比，细胞活力升高，GSH含量、SLC7A11和GPX4蛋白表达水平升高，而Ferritin蛋白表达水平降低，差异均有统计学意义(均P<0.05);MDA含量和ROS荧光强度以及肾损伤标志物NGAL和KIM-1水平下降，差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 AG对LPS诱导的HK-2细胞损伤具有保护作用，其机制可能是激活SLC7A11/GPX4通路，减少氧化应激，上调抗氧化酶活性，减轻细胞铁死亡。

关键词

穿心莲内酯 / 肾小管上皮细胞 / HK-2 / 铁死亡 / SLC7A11 / Xc-系统 / 机制