近平滑念珠菌临床分离菌株毒力因子差异表达研究

摘要

目的 比较近平滑念珠菌临床分离株毒力相关因子天冬氨酸蛋白酶和生物膜形成及其基因表达的差异。方法 采用基因测序及微卫星分型方法，对临床真菌感染患者分离的近平滑念珠菌进行鉴定，检测各菌株产生分泌型天冬氨酸蛋白酶及生物膜形成的能力，比较各菌株生物膜形成相关基因BCR1、EFG1、HWP1及天冬氨酸蛋白酶毒力基因SAPP1、SAPP2、SAPP3表达的差异。结果 共收集8株临床分离的近平滑念珠菌，经基因鉴定均为基因Ⅰ型。微卫星分型结果显示，8株临床菌株分为4个微卫星型别，G1、G2、G3菌株为不同型别，分别分离自甲患者的尿、经外周静脉置入中心静脉导管(PICC)和血；J1、J2、J3、J4、J5菌株为同一型别，分离自乙患者不同时期血标本。8株临床菌株均能形成生物膜，生物膜形成能力均高于近平滑念珠菌标准菌株ATCC 22019,其中G1、G3和J5菌株生物膜形成能力强，J1、J2、J3、J4菌株生物膜形成能力中等，G2菌株生物膜形成能力弱。8株临床分离菌株均分泌天冬氨酸蛋白酶，酶体外表达水平均高于近平滑念珠菌标准菌株ATCC 22019,G3、G1、G2菌株分别为低表达、中表达、高表达，酶体外表达水平比较，差异均有统计学意义(均P<0.05);J1、J5菌株为中表达，J2、J3、J4菌株为高表达，中表达菌株与高表达菌株比较，差异有统计学意义(P<0.05)。甲、乙患者分离的各菌株生物膜形成基因BCR1、EFG1、HWP1表达水平均增加，其中甲患者G1菌株EFG1基因表达水平高于G2菌株(P<0.05),乙患者分离的菌株BCR1、EFG1、HWP1基因表达水平差异无统计学意义。甲、乙患者分离的各菌株天冬氨酸蛋白基因SAPP1、SAPP2、SAPP3表达水平均增加，其中G1菌株的SAPP1和SAPP2表达水平高于G2、G3(均P<0.05),乙患者SAPP1、SAPP2、SAPP3基因表达水平差异无统计学意义。结论 近平滑念珠菌临床分离株生物膜形成和天冬氨酸蛋白酶产生能力均高于标准菌株，分离自不同标本的菌株毒力因子表达具有差异性，不同时期分离的菌株毒力因子表达差异不明显。患者可能存在同一时期多部位感染不同MT型别近平滑念珠菌的情况。

关键词

近平滑念珠菌 / 毒力因子 / 生物膜 / 分泌型天冬氨酸蛋白酶