鲍曼不动杆菌生物膜形成、外膜蛋白OmpA/CarO表达与碳青霉烯类耐药相关研究

摘要

目的 探讨鲍曼不动杆菌生物膜形成及其外膜蛋白OmpA、CarO表达，以及与碳青霉烯类抗生素耐药的相关性。方法 采用结晶紫染色法定性定量检测临床分离鲍曼不动杆菌的生物膜形成能力。通过微量肉汤稀释法测定菌株对亚胺培南的最低抑菌浓度(MIC)及生物膜最低抑菌浓度(MBIC)。计算MBIC/MIC比值，比较浮游态与生物膜态菌株的耐药差异。提取亚胺培南耐药菌株在两种状态下的总RNA,采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测外膜蛋白OmpA、CarO基因的相对表达量，分析其对鲍曼不动杆菌碳青霉烯类耐药的可能影响。结果 108株鲍曼不动杆菌中，亚胺培南耐药菌株检出率为61.1%,生物膜阳性菌株检出率为93.5%,其中生物膜弱阳性44株(占43.6%),生物膜中等阳性45株(占44.5%),生物膜强阳性12株(占11.9%)。MBIC/MIC值分析显示，无论耐药或敏感菌株，形成生物膜后耐药性均增强：亚胺培南耐药株多数菌株耐药性增加4～8倍，敏感株多数增加2～4倍。荧光定量PCR结果显示，与浮游态相比，生物膜态下鲍曼不动杆菌外膜蛋白OmpA表达量显著升高(t=5.385,P<0.001),外膜孔道蛋白CarO表达量显著降低(t=-4.359,P<0.001)。结论 生物膜形成可增强鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类药物的耐药性。该过程中OmpA表达上调和CarO表达下调可能是其耐药性增强的重要机制之一。

关键词

鲍曼不动杆菌 / 碳青霉烯类耐药性 / 生物膜 / 外膜蛋白 / OmpA / 外膜孔道蛋白 / CarO

基金资助

川北医学院国家级项目申报预研项目资助(CBY19-YZ02)