荧光PCR-熔解曲线法检测结核分枝杆菌复合群对异烟肼、氟喹诺酮类药物耐药性的检测性能评价

摘要

目的 评估一种新的荧光PCR-熔解曲线法(简称“熔解曲线法”)检测结核分枝杆菌复合群(MTBC)对异烟肼(INH)和氟喹诺酮类药物(FQS)耐药性的应用价值。方法 前瞻性收集2024年4—10月湖南省胸科医院肺结核住院患者痰标本，依据纳入和排除标准，共筛选出231例病原学阳性的结核病患者标本，对其进行Sanger测序、BACTEC MGIT 960 (简称“MGIT 960”)液体培养和表型药敏试验，同时采用熔解曲线法检测INH、FQS相关耐药基因突变，排除28份熔解曲线结果阴性的标本，最终纳入203份MTBC阳性标本。分别以Sanger测序和表型药敏结果为参考标准，计算熔解曲线法检测INH和FQS耐药性的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值，分析两者一致性(kappa检验)。结果 以Sanger测序为参考标准，熔解曲线法检测MTBC对INH、FQS耐药性的灵敏度分别为97.92%(95%CI:89.11%～99.63%)、100%(95%CI:88.97%～100%),特异度分别为100%(95%CI:97.47%～100%)、100%(95%CI:97.72%～100%),两者一致性高(kappa值分别为0.986、1.000)。以表型药敏试验为参考标准，熔解曲线法检测MTBC对INH、FQS耐药性的灵敏度分别为96.67%(95%CI:83.33%～99.41%)、94.44%(95%CI:74.24%～99.01%),特异度分别为98.55%(95%CI:92.24%～99.74%)、97.53%(95%CI:91.44%～99.32%),两者一致性高(kappa值分别为0.952、0.900)。结论 熔解曲线法对INH、FQS耐药突变检测具有较高的灵敏度和特异度，对耐药结核病早期、快速诊断具有重要价值。

关键词

熔解曲线法 / 痰液 / 结核分枝杆菌复合群 / 耐药 / 异烟肼 / 氟喹诺酮类药物

基金资助

湖南省卫生健康高层次人才重大科研项目(R2023098)