芎芍胶囊PFG对氧化低密度脂蛋白诱导的血管内皮细胞损伤的保护作用及机制研究

摘要

目的 探讨芎芍胶囊中天然活性成分芍药苷元酮(paeoniflorigenone, PFG)对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的血管内皮细胞损伤的保护作用及机制研究。方法 采用网络药理学和分子对接技术，鉴定芎芍胶囊治疗动脉粥样硬化的枢纽靶点以及关键活性成分。将人脐静脉血管内皮细胞株(HUVECs)分为对照、ox-LDL(100μg/mL)、PFG低剂量(20μmol/L)、PFG高剂量(80μmol/L)组。使用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法评估PFG(10～160μmol/L)和ox-LDL(5～200μg/mL)的细胞毒性，并检测不同浓度(10、20、40、80μmol/L)PFG干预24 h对ox-LDL诱导的HUVECs活力的影响。采用流式细胞术检测各组细胞的凋亡率。采用酶联免疫吸附法检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)和白细胞介素-1β(IL-1β)的释放。利用逆转录定量PCR(qRT-PCR)检测各组细胞中枢纽基因(EGFR、PIK3CA和SRC)的mRNA表达水平。结果 网络药理学与分子对接分析表明，PFG是芎芍胶囊治疗动脉粥样硬化的关键活性成分，其可与枢纽靶点(EGFR、PIK3CA和SRC)稳定结合，结合亲和力均<-7.0 kcal/mol。体外实验表明，与对照组相比，PFG处理组的HUVECs活力没有明显改变，而ox-LDL治疗组的细胞活力显著降低，细胞凋亡水平、促炎细胞因子(TNF-α、IL-6、IL-1β)浓度以及枢纽靶点(EGFR、PIK3CA和SRC)的mRNA表达水平显著增加(均P<0.05);相较于ox-LDL组，PFG干预组的细胞活力显著增加，而细胞凋亡水平、促炎细胞因子浓度和枢纽靶点的mRNA表达水平均显著下降(均P<0.05),且呈剂量依赖性。结论 该研究表明，芎芍胶囊关键活性成分PFG可能通过EGFR/PIK3CA/SRC调控机制拮抗ox-LDL诱导的血管内皮细胞损伤。

关键词

芍药苷元酮 / 芎芍胶囊 / 血管内皮细胞 / 动脉粥样硬化 / 网络药理学 / 分子对接