血管性痴呆小鼠模型通过RIPK1/RIPK3/MLKL信号通路诱导的海马区神经元程序性坏死对其学习记忆障碍的影响

摘要

目的 研究血管性痴呆(vascular dementia, VaD)小鼠模型海马神经元的死亡机制，探讨海马神经元程序性坏死与VaD小鼠学习记忆受损之间的关系。方法 慢性脑低灌注血管性痴呆小鼠模型采用双侧血管阻断法(bilateral occlusion of the common carotid arteries, 2VO)构建。用Morris水迷宫检测小鼠模型学习记忆能力。用实时荧光定量PCR(qPCR)法检测动物模型海马区神经元RIPK1、RIPK3和MLKL mRNA的表达。免疫印迹法检测RIPK1、RIPK3、pRIPK3和MLKL蛋白的表达，并与小鼠模型学习记忆能力进行相关性分析。免疫荧光双标记法检测RIPK1、RIPK3和MLKL的共定位情况。结果 qPCR检测发现，与假手术组相比，VaD组小鼠模型海马区神经元RIPK1、RIPK3和MLKL的mRNA表达显著增高。免疫印迹结果显示VaD组小鼠模型海马区神经元RIPK1、pRIPK3、和MLKL的蛋白表达水平明显增高。免疫荧光双标记显示在小鼠模型海马区，RIPK1、RIPK3与MLKL共表达定位显著增强。进一步研究发现，程序性坏死标志物RIPK1、RIPK3和MLKL的表达与小鼠模型目标象限停留时间及穿越平台次数呈负相关关系。结论 在VaD小鼠模型中，海马神经元的丢失及其学习记忆功能障碍的发生发展，可能是通过激活RIPK1/RIPK3/MLKL信号通路，进而引起海马神经元程序性坏死所致。

关键词

血管性痴呆 / 认知障碍 / 程序性坏死 / 慢性脑低灌注 / 海马