肿瘤相关成纤维细胞中FAP的表达水平对食管鳞癌恶性进展的影响

摘要

目的 探究成纤维细胞活化蛋白(fibroblast activation protein, FAP)在食管鳞癌(esophageal squamous cell carcinoma, ESCC)中的表达水平及对其预后的影响，进一步研究肿瘤相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts, CAFs)中FAP的表达对ESCC恶性进展的影响。方法 首先，通过TCGA数据库评估FAP在31种肿瘤的癌和癌旁组织中表达水平的差异，并分析其对ESCC患者预后的影响；进一步收集高发区ESCC患者癌和癌旁新鲜组织用于原代CAFs和癌旁正常成纤维细胞(normal fibroblasts, NFs)的提取和分离，利用qRT-PCR、Western blot和细胞免疫荧光进行表型鉴定和功能分析；收集NFs、CAFs和经FAP抑制剂(FAPi)处理后的CAFs细胞上清，与KYSE150细胞构建体外共培养模型，通过EdU法、CCK-8法、平板克隆、Transwell和划痕实验探究FAP表达水平对KYSE150细胞增殖、侵袭和迁移等恶性行为的影响；最后，通过构建食管癌小鼠皮下荷瘤模型，在体内探究CAFs中FAP的表达对ESCC恶性进展的影响。结果 在包含ESCC在内的10种恶性肿瘤中，癌组织中FAP的表达均显著高于癌旁组织，且ESCC中FAP的高表达提示患者的不良预后，并且FAP可作为ESCC患者预后的独立危险因素；从ESCC及其癌旁组织中成功提取、分离出原代CAFs和NFs,经鉴定表型正确；体外共培养结果显示，与NFs相比，CAFs高表达FAP并显著促进ESCC细胞的增殖、侵袭和迁移能力，而FAPi处理可显著抑制上述恶性行为；体内实验证实FAPi和CAFs去激活处理，对荷瘤小鼠肿瘤生长具有显著抑制作用。结论 在ESCC中，FAP的高表达与CAFs的活化和患者的不良预后呈正相关，促进肿瘤的恶性进展。

关键词

食管鳞癌 / 成纤维细胞活化蛋白 / 肿瘤相关成纤维细胞

基金资助

国家自然科学基金资助项目（No.82302966）; 河南省医学科技攻关省部共建重点项目（No.SBGJ202102199,No.LHGJ20230455）; 河南省省级科技研发计划联合基金资助项目（No.232103810048）; 洛阳市社会发展公益专项（No.2302016A,No.2302016Y)