Agrin/Rapsyn对脊髓损伤大鼠小胶质细胞抑炎作用的实验研究

摘要

目的 研究聚集蛋白(Agrin)、支架蛋白(Rapsyn)激活α4β2尼古丁乙酰胆碱受体(α4β2 nAChR)抑制SD大鼠的损伤脊髓组织中小胶质细胞与巨噬细胞的炎性作用。方法 以4周龄SD大鼠制作脊髓损伤模型，巨噬细胞培养后以Agrin与Rapsyn孵育，流式细胞术检测小胶质细胞与巨噬细胞标记物的变化及免疫共沉淀(Co-IP)检测两种蛋白的互作，慢病毒注射脊髓损伤(SCI)模型后qRT-PCR、免疫组织化学(IHC)检测脊髓组织中炎性细胞标记物的变化。结果 脊髓损伤后1～14 d小胶质细胞与巨噬细胞呈增高趋势(均P<0.01),3～7 d增长最快；经qRT-PCR分析得出SCI后炎性小胶质细胞因子(CD68)和可溶性炎性因子(IL-1β和CCL3)上调。经过鞘内注射Agrin和Rapsyn过表达的慢病毒，在0～1周的观察中，A组和R组有轻度减弱这些标记物的上调，而A/R组显著减弱了这些标记的上调(均P<0.01);经IHC分析可见，在A/R组比A组和R组小胶质细胞标记细胞数量明显减少(均P<0.01)。结论 SCI后Agrin、Rapsyn激活α4β2 nAChR而产生对小胶质细胞及炎性巨噬细胞的抑制作用，从而可能阻断或减缓脊髓损伤的进展。

关键词

脊髓损伤 / Agrin / Rapsyn / 小胶质细胞 / 抑炎作用