牙龈卟啉单胞菌通过HIF-1α增加线粒体自噬活性抑制食管鳞癌细胞铁死亡

摘要

目的 探讨牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)抑制食管鳞癌(esophageal squamous cell carcinoma, ESCC)细胞铁死亡发生的分子机制。方法 铁死亡诱导剂RSL3处理未感染对照和Pg感染的KYSE30细胞和KYSE70细胞，荧光共聚焦显微镜检测线粒体自噬和线粒体活性氧(reactive oxygen species, ROS)含量。线粒体自噬抑制剂(Mdivi-1)处理KYSE30细胞和KYSE70细胞，检测细胞内丙二醛(malondialdehyde, MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)等铁死亡相关分子的表达变化。激活或抑制缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α),免疫荧光检测线粒体自噬变化，Western blot和RT-PCR检测SLC39A14和IREB2 mRNA和蛋白表达变化。结果 RSL3诱导的KYSE30细胞和KYSE70细胞铁死亡发生伴随线粒体自噬活性降低，Pg单独感染ESCC细胞增强了线粒体自噬活性，Pg感染和RSL3的共同处理逆转了RSL3对线粒体自噬的抑制作用及RSL3诱导的ESCC细胞铁死亡发生，以Mdivi-1抑制线粒体自噬阻断了Pg的上述抗铁死亡作用。在KYSE30细胞和KYSE70细胞中抑制HIF-1α下调了SLC39A14和IREB2 mRNA和蛋白表达，抑制了线粒体自噬发生，而激活HIF-1α则产生了相反作用。结论 Pg通过激活HIF-1α增加线粒体自噬活性并抑制食管鳞癌细胞铁死亡。

关键词

食管鳞癌 / 牙龈卟啉单胞菌 / 线粒体自噬 / HIF-1α / 铁死亡

基金资助

国家自然科学基金资助项目（No.81872037）; 河南省医学科技攻关联合共建重点项目（No.LHGJ20240439）