棕榈酸通过下调KLF4促进子宫内膜癌细胞的恶性生物学行为

摘要

目的 阐明肥胖后棕榈酸(palmitic acid, PA)含量增加是否可通过上调DNMT1/3b抑制KLF4表达，进而调控子宫内膜癌(endometrial cancer, EC)细胞的生物学行为。方法 收集非EC对照个体(n=120)和EC患者(n=30)一般资料，分析两组肥胖相关表型的差异；收集非EC对照个体子宫内膜组织(n=20)和EC患者癌组织(n=20),免疫组织化学法检测子宫内膜组织中KLF4、DNMT1/3b表达情况；体外培养EC细胞，qRT-PCR和Western blot检测细胞中DNMTs/KLF4/MMP2等因子的mRNA和蛋白表达水平，CCK-8、Transwell和划痕实验检测EC细胞的增殖、迁移与侵袭能力；构建肥胖小鼠的EC荷瘤模型，观察EC细胞或过表达KLF4的EC细胞在小鼠体内的成瘤能力。结果 EC患者的体重、体质量指数、血浆低密度脂蛋白及游离脂肪酸含量均显著高于非癌受试个体(均P<0.05);EC患者中超重/肥胖者占比高于非癌受试个体(73.33%vs.50.00%,P<0.05);EC患者肿瘤组织中KLF4表达水平显著降低，DNMT1/3b的表达水平显著升高，KLF4表达水平与血清中游离脂肪酸(FFAs)含量呈显著负相关。PA处理后，EC细胞中KLF4表达水平显著降低，DNMT1/3b以及MMP2表达水平显著升高，细胞迁移与侵袭能力显著增强，细胞增殖能力无显著变化；上调KLF4后，EC细胞中MMP2表达水平显著降低，细胞迁移与侵袭能力显著减弱；下调KLF4后，EC细胞中MMP2表达水平显著升高，细胞迁移与侵袭能力显著增强；PA处理的同时上调KLF4,可显著逆转PA处理对EC细胞MMP2表达水平及其迁移与侵袭能力的促进作用；分别下调DNMT1和DNMT3b后，EC细胞中KLF4的表达水平均显著增加；PA处理的同时分别下调DNMT1和DNMT3b后，均可显著逆转PA处理对EC细胞中KLF4表达水平的抑制作用；EC细胞在高脂饮食诱导的肥胖小鼠体内成瘤能力显著增强，而过表达KLF4后的EC细胞在高脂饮食诱导的肥胖小鼠体内成瘤能力显著减弱。结论 肥胖后血浆PA含量增加，通过下调DNMT1/DNMT3b抑制KLF4表达，促进子宫内膜癌细胞的迁移、侵袭以及体内成瘤能力。

关键词

棕榈酸 / DNMT1/DNMT3b / KLF4 / 子宫内膜癌

基金资助

国家自然科学基金资助项目(No.82160496); 新疆生产建设兵团重点领域科技攻关项目(No.2022ZD001,No.2022AB022)