肌苷单磷酸脱氢酶在卵清蛋白诱导过敏性哮喘中的作用

摘要

目的 探讨肌苷单磷酸脱氢酶（inosine monophosphate dehydrogenase, IMPDH）在卵清蛋白（ovalbumin, OVA）诱导过敏性哮喘发生发展中的作用。方法 将36只BALB/c雌性小鼠随机分为健康对照组、OVA哮喘组和IMPDH抑制剂（利巴韦林）干预组，每组12只。收集每只小鼠的肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid, BALF）、肺组织、外周血及脾脏，采用苏木精-伊红染色分析肺组织病理改变，免疫组织化学法检测肺组织内CD3的表达情况，血球分析仪检测BALF和外周血中白细胞总数及分类计数，qRT-PCR和Western blot分别检测肺组织IMPDH mRNA和蛋白表达水平，免疫荧光法检测肺组织IMPDH蛋白定位和表达情况，流式细胞术检测外周血和脾脏淋巴细胞亚群及其细胞内IMPDH蛋白表达水平。结果 与健康对照组相比，OVA哮喘组小鼠肺内小气道周围及肺泡间隔大量炎症细胞浸润，BALF和外周血中白细胞总数均显著增加，以中性粒细胞、嗜酸性粒细胞和单核细胞的数量增多为主（均P<0.05）,且肺组织内IMDPH蛋白水平显著升高（P<0.05）,炎症细胞胞质内明显增多的IMPDH蛋白呈分散模式。给予利巴韦林干预后哮喘小鼠肺部炎症明显减轻，尤以BALF中嗜酸性粒细胞和中性粒细胞显著减少为特征（均P<0.05）,同时肺部IMPDH蛋白水平降低（P<0.05）,炎症细胞胞质内IMPDH表达减少，但细胞核内出现较多IMPDH丝状结构。此外，OVA哮喘组小鼠脾脏中B细胞占比明显增多（P<0.05）,但利巴韦林干预后哮喘小鼠脾脏中B细胞占比显著减少，而NK、CD3⁺T和CD8⁺T细胞占比较OVA哮喘组明显增高（均P<0.05）。同时利巴韦林干预组脾脏NK细胞内IMPDH蛋白表达水平较健康对照组升高，而CD8⁺T细胞内IMPDH蛋白表达水平降低。结论 抑制IMPDH可有效缓解以啫酸性粒细胞为主的气道及全身炎症反应，同时还能降低脾脏B细胞免疫应答，增强NK及CD8⁺T细胞等杀伤细胞的免疫应答效应，其潜在的机制可能与炎症细胞内IMPDH表达量及其形成的丝状结构有关。

关键词

肌苷单磷酸脱氢酶 / 过敏性哮喘 / 气道炎症 / 淋巴细胞 / 利巴韦林

基金资助

国家自然科学基金资助项目(No.81903278); 武汉科技大学研究生创新创业基金项目(No.JCX2023120);武汉科技大学“十四五”湖北省优势特色学科(群)项目(No.2023C0101)