虎杖苷调节YAP1/TAZ信号通路对缺氧性肺动脉高压新生大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖与凋亡的影响

摘要

目的 探究虎杖苷（PD）对缺氧性肺动脉高压（HPH）新生大鼠肺动脉平滑肌细胞（PASMCs）增殖与凋亡的影响及其作用机制。方法 将新生大鼠随机分为6组：对照组、模型组、PD低剂量组、PD中剂量组、PD高剂量组、PD高剂量+Hippo通路抑制剂（PD高剂量+XMU-MP-1）组，每组10只。缺氧2周后，检测各组大鼠右心室收缩压（RVSP）和右心室肥厚指数（RVHI）,苏木精-伊红（HE）染色观察肺组织病理学变化，并计算肺动脉管壁厚度占总厚度的百分比（WT%）和管壁面积占总面积的百分比（WA%）。分离各组新生大鼠PASMCs,分为NC组、低氧（Hypoxia）组、PD低剂量组、PD中剂量组、PD高剂量组、PD高剂量+XMU-MP-1组。CCK-8和EdU检测细胞增殖，流式细胞术检测细胞凋亡，免疫印迹（Western blot）检测肺组织和PASMCs中Yes相关蛋白1（YAP1）、PDZ结合域的转录共刺激因子信号通路（TAZ）、哺乳动物不育系20样激酶1（MST1）、B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）、Bcl-2相关蛋白（Bax）蛋白表达。结果 与对照组相比，模型组大鼠肺动脉管壁明显增厚，管腔变窄，RVSP、RVHI、WT%、WA%、YAP1、MST1、TAZ蛋白表达显著升高（均P<0.05）;与模型组相比，PD低、中、高剂量组大鼠肺动脉增厚减少，管腔变大，RVSP、RVHI、WT%、WA%、YAP1、MST1、TAZ蛋白表达显著降低，且PD各组间差异存在剂量依赖性（均P<0.05）;XMU-MP-1可逆转这一结果。与NC组相比，Hypoxia组细胞A_450nm值、EdU阳性率、YAP1、MST1、TAZ、Bcl-2蛋白表达显著升高，凋亡率、Bax蛋白表达显著降低（均P<0.05）;与Hypoxia组相比，PD低、中、高剂量组细胞A_450nm值、EdU阳性率、YAP1、MST1、TAZ、Bcl-2蛋白表达显著降低，凋亡率、Bax表达显著升高，且PD各组间有剂量依赖性（均P<0.05）;XMU-MP-1可逆转这一结果。结论 PD可能通过抑制YAP1/TAZ信号通路抑制HPH新生大鼠PASMCs增殖，促进凋亡。

关键词

缺氧性肺动脉高压 / 虎杖苷 / 肺动脉平滑肌细胞 / 增殖 / 凋亡 / YAP1/TAZ信号通路