S1P通过调控S1PR1对高糖诱导的血管内皮细胞损伤的保护作用

摘要

目的 探究1-磷酸鞘氨醇(sphingosine-1-phosphate, S1P)对高糖诱导血管内皮细胞损伤的作用及机制。方法利用高糖诱导人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells, HUVECs)损伤，使用S1P及其1型受体(S1PR1)的小干扰RNA(si-S1PR1)处理细胞。采用qRT-PCR检测S1PR1转录水平以筛选高沉默效率的si-S1PR1用于后续实验，实验细胞分为对照组(NG)、高渗组(L-Glu)、高糖组(HG)、高糖+S1P组(HG+S1P)、高糖+si-NC+S1P组(HG+si-NC+S1P)、高糖+si-S1PR1+S1P组(HG+si-S1PR1+S1P)。应用CCK-8检测细胞增殖活力，划痕法检测细胞迁移能力，成管实验检测细胞血管形成能力，Western blot检测S1PR1及血管功能相关分子VEGF、VE-cadherin、eNOS的蛋白表达水平。结果 与对照组相比，高糖组血管内皮细胞的增殖活力、迁移能力和血管形成能力均显著下降，并伴有S1PR1的表达降低(均P<0.01);同时高糖组细胞血管功能相关分子VEGF、VE-cadherin和eNOS的表达水平显著降低(均P<0.01);给予S1P干预后，S1PR1的表达水平及细胞活力、迁移和血管形成能力均显著回升，同时VEGF、VE-cadherin和eNOS蛋白表达水平亦显著增加(均P<0.01);而以si-S1PR1下调S1PR1表达则抵消了S1P对内皮细胞活力、迁移能力、血管形成能力及功能相关蛋白表达的恢复作用(均P<0.01)。结论 S1P通过S1PR1上调血管功能相关分子VEGF、VE-cadherin、eNOS等的表达，对高糖环境下的血管内皮细胞发挥保护作用。

关键词

1-磷酸鞘氨醇 / 高糖 / 血管内皮细胞 / 血管功能