亚精胺通过miR-451介导自噬缓解阿霉素诱导的心肌细胞衰老

摘要

目的 评估亚精胺(spermidine, SPD)对miR-451-5p的调控作用及通过调控miR-451-5p对衰老的心肌细胞增殖活性和自噬的影响。方法 阿霉素处理大鼠心肌H9C2细胞，构建心肌衰老细胞模型。将细胞分为对照(Control)组，模型(Model)组，阴性对照(NC)+SPD组和miR-451-5p抑制剂(Inhibitor)+SPD组。除Control组外，其余组均采用阿霉素构建心肌衰老细胞模型，NC+SPD组和Inhibitor+SPD组细胞造模后分别转染miR-NC和miR-451-5p inhibitor,并用10μmol/L的SPD处理24 h。CCK-8检测细胞增殖活性，β-半乳糖苷酶染色(SA-β-gal)检测心肌细胞衰老情况，Western blot检测细胞中心肌衰老标志物P21蛋白的表达，qRT-PCR检测细胞中miR-451-5p、自噬标志物(LC3Ⅱ和Beclin1)的mRNA表达。结果 与正常H9C2细胞相比，心肌衰老细胞模型中miR-451-5p低表达(P<0.05)。与Control组相比，Model组细胞增殖活性下降(P<0.05),SA-β-gal阳性的染色面积增加，P21蛋白表达上调(均P<0.05),miR-451-5p、LC3Ⅱ和Beclin1 mRNA表达下调(均P<0.05)。与Model组相比，NC+SPD组细胞增殖活性增加，SA-β-gal阳性的染色面积减少(均P<0.05),P21蛋白表达下调(P<0.05),miR-451-5p、LC3Ⅱ和Beclin1 mRNA表达上调(均P<0.05)。与NC+SPD组相比，Inhibitor+SPD组细胞增殖活性下降(P<0.05),SA-β-gal阳性的染色面积增加，P21蛋白表达上调(均P<0.05),miR-451-5p、LC3Ⅱ和Beclin1 mRNA表达下调(均P<0.05)。结论 亚精胺可通过上调miR-451-5p的表达促进心肌衰老模型细胞的增殖和自噬，进而缓解心肌细胞的衰老。

关键词

心肌细胞 / 亚精胺 / miR-451 / 自噬 / 细胞衰老