根皮素通过抑制FAK改善肾小管间质纤维化

摘要

目的 探究根皮素能否通过抑制黏着斑激酶(FAK)改善肾小管间质纤维化。方法 肾小管上皮细胞NRK-52E经TGF-β1(10 ng/mL)诱导建立肾纤维化细胞模型，并构建单侧输尿管梗阻(UUO)肾间质纤维化小鼠模型。通过免疫荧光及Western blot法检测细胞及小鼠肾脏组织中α-SMA、FN的蛋白表达水平，明确根皮素体内外抗肾纤维化作用；检测实验小鼠血清中肌酐(Cr)和尿素氮(BUN)水平，分析根皮素的肾保护作用；以苏木精-伊红(HE)染色和Masson染色观察根皮素对UUO小鼠肾脏病理学改变和胶原纤维沉积的影响；Western blot检测TGF-β1诱导的NRK-52E细胞和UUO小鼠肾组织中FAK、p-FAK的蛋白表达水平；通过分子对接预测根皮素与FAK蛋白的潜在结合模式和结合能力；使用FAK抑制剂PND-1186,探究根皮素改善肾间质纤维化的作用机制。结果 根皮素可逆转TGF-β1所致的肾小管上皮细胞及UUO小鼠肾组织中α-SMA、FN的蛋白表达水平升高，且显著降低UUO小鼠血清中Cr、BUN水平，改善UUO小鼠肾小管扩张、炎性细胞浸润及间质胶原沉积；根皮素可以显著抑制UUO小鼠肾组织中FAK、p-FAK蛋白的表达水平，分子对接提示根皮素与FAK蛋白之间具有良好相互作用。根皮素与PND-1186均可改善TGF-β1诱导的NRK-52E细胞纤维化。结论 根皮素通过抑制FAK信号通路在体内外发挥抗肾间质纤维化作用。

关键词

根皮素 / 单侧输尿管梗阻 / 肾保护 / 肾间质纤维化 / 黏着斑激酶

基金资助

湖北省卫生健康委青年人才项目(No.WJ2021Q010); 湖北省教育厅重点项目(No.D20192101); 湖北医药学院研究生科技创新项目(No.YC2023067);湖北医药学院“十四五”湖北省高等学校优势特色学科群(生物与医药)资助项目(No.2022BMXKQT1);湖北医药学院大学生创新创业训练计划(No.X202310929009,No.X202310929010)