GPER通过激活AMPK-PDHA1/CPT1B通路改善脓毒症肝细胞线粒体功能障碍的机制研究

摘要

目的 探讨G蛋白偶联雌激素受体(GPER)改善脓毒症患者肝细胞线粒体功能障碍的可能作用机制。方法采用AML-12肝细胞构建内毒素(LPS)诱导的脓毒症模型，设空白对照组、LPS组、LPS+G1组(GPER激动剂)和LPS+G15组(GPER拮抗剂)。通过CCK-8、流式细胞术、ELISA等技术评估细胞活力、凋亡、炎症因子(TNF-α,IL-1β,IL-6)及能量代谢指标(ATP/AMP)。采用qRT-PCR和Western blot分别检测GPER的mRNA和蛋白表达水平。采用Western blot分析AMPK磷酸化(p-AMPK)及其下游代谢酶丙酮酸脱氢酶E1α亚基(PDHA1)和肉碱棕榈酰转移酶1B(CPT1B)的蛋白表达。通过激光共聚焦显微镜和流式细胞术分别检测线粒体活性氧(mtROS)和线粒体膜电位(ΔΨm),并利用透射电镜观察线粒体超微结构。结果 在LPS诱导的肝细胞脓毒症模型中，GPER激动剂G1不仅能显著改善细胞活力、抑制凋亡并减轻炎症反应，还能有效逆转能量代谢障碍、降低氧化应激水平(均P<0.01),并修复线粒体超微结构损伤。相反，GPER拮抗剂G15不仅完全阻断了G1的保护作用，还进一步加剧了上述各项损伤指标(均P<0.01)。结论 GPER通过激活AMPK-PDHA1/CPT1B轴，优化糖脂代谢，恢复线粒体能量稳态并抑制氧化应激，从而减轻脓毒症肝细胞损伤，为脓毒症肝损伤的性别差异化治疗提供新靶点。

关键词

G蛋白偶联雌激素受体 / AMP活化蛋白激酶 / 丙酮酸脱氢酶E1α亚基 / 肉碱棕榈酰转移酶1B / 脓毒症 / 线粒体功能障碍