紫花前胡素通过miR-17-5p靶向PI3K/Akt通路对结直肠癌细胞增殖和迁移的影响

摘要

目的 探讨紫花前胡素(Decursin, DE)对结直肠癌细胞增殖和迁移的影响及其具体机制。方法 选取SW480、HCoEpiC细胞进行实验，qRT-PCR法检测两种细胞系中miR-17-5p表达水平。CCK-8法检测不同DE浓度梯度(0、10、30、60和100μmol/L)下SW480细胞增殖活性。qRT-PCR法检测SW480细胞中miR-17-5p(mimic/inhibitor)的转染效率，CCK-8法检测转染后细胞增殖活性，Transwell实验检测迁移细胞数。建立转染(mimic/inhibitor)组与转染(mimic/inhibitor)+DE组SW480细胞，采用qRT-PCR法检测miR-17-5p表达量变化，CCK-8法检测细胞增殖活性，Transwell实验检测迁移细胞数，Western blot法检测PIK3R1、p-PI3K、PI3K、p-Akt、Akt蛋白表达量变化。双荧光素酶报告基因实验检测miR-17-5p与PI3K的靶向作用。结果 SW480细胞miR-17-5p表达水平高于HCoEpiC细胞(P<0.05)。SW480细胞增殖活性随DE处理浓度的升高呈现浓度依赖性降低(P<0.05);选择60μmol/L DE用于后续实验。miR-17-5p mimic/inhibitor可显著升高/降低SW480细胞中miR-17-5p的表达量、细胞增殖活性和细胞迁移数(均P<0.05)。加入DE后各组miR-17-5p表达量、细胞增殖活性、细胞迁移数以及p-PI3K和p-Akt蛋白表达量降低(均P<0.05),PIK3R1蛋白表达量升高(P<0.05),PI3K、Akt蛋白表达量无明显变化。共转染miR-17-5p与Wt-PIK3R1,荧光素酶相对活性随miR-17-5p表达量的升高/降低而降低/升高(均P<0.05)。共转染miR-17-5p与Mut-PIK3R1,荧光素酶相对活性无显著变化(P>0.05)。结论 DE可抑制结直肠癌细胞增殖和迁移，其机制可能是通过下调miR-17-5p从而促进PIK3R1表达，抑制PI3K/Akt通路发挥作用。

关键词

结直肠癌 / 紫花前胡素 / 细胞增殖 / 细胞迁移 / miR-17-5p

基金资助

2021年河南省医学科技攻关计划省部共建重点项目(No.SBGJ202102121)