通窍活血汤调控Caspase-3/GSDME通路介导的细胞焦亡改善阿尔茨海默病模型大鼠认知功能

摘要

目的 探讨通窍活血汤（TQHXD）调控天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）/Gasdermin E（GSDME）通路介导的细胞焦亡改善阿尔茨海默病（AD）模型大鼠认知功能的作用机制。方法 大鼠随机分为正常组、AD组、TQHXD低剂量组、TQHXD高剂量组、多奈哌齐组、TQHXD高剂量+Caspase-3激活剂（Raptinal）组，每组12只。除正常组外，其他组大鼠均通过双侧海马注射β淀粉样蛋白25-35(Aβ_25-35)法构建AD模型，建模成功后分组给药处理，持续4周。Morris水迷宫实验检测各组大鼠认知功能；苏木精-伊红（HE）染色检测各组大鼠脑海马CA1区组织病理改变并进行神经病理评分；免疫荧光染色检测海马CA1区GSDME氨基端片段（GSDME-N）阳性细胞数；ELISA法检测海马CA1区中白细胞介素-1β（IL-1β）、IL-18水平；Western blot检测海马CA1区中裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（cleaved Caspase-3）、GSDME-N蛋白表达水平。结果 与正常组比较，AD组大鼠神经元排列紊乱，核固缩，炎性细胞浸润明显；逃避潜伏期增加，跨越平台数减少；神经病理评分，海马CA1区组织中GSDME-N阳性细胞数，IL-1β、IL-18水平及cleaved Caspase-3、GSDME-N蛋白表达水平升高（均P<0.05）。与AD组比较，TQHXD低剂量组、TQHXD高剂量组、多奈哌齐组大鼠海马CA1区病理损伤减轻；逃避潜伏期减少，跨越平台数增加；神经病理评分，海马CA1区组织中GSDME-N阳性细胞数，IL-1β、IL-18水平及cleaved Caspase-3、GSDME-N蛋白表达水平降低（均P<0.05）。与TQHXD高剂量组比较，TQHXD高剂量+Raptinal组海马CA1区病理损伤更为严重；逃避潜伏期增加，跨越平台数减少；神经病理评分，海马CA1区组织中GSDME-N阳性细胞数，IL-1β、IL-18水平及cleaved Caspase-3、GSDME-N蛋白表达升高（均P<0.05）。结论 TQHXD可能通过抑制Caspase-3/GSDME通路抑制AD大鼠神经元焦亡及神经炎症，改善认知功能。

关键词

通窍活血汤 / 阿尔茨海默病 / 神经元焦亡 / 神经炎症 / 认知功能

基金资助

河南省中医药科学研究专项计划资助（No.2022ZYZD07）