基质细胞衍生因子1α通过Akt信号通路抑制软骨细胞凋亡并促进自噬

摘要

目的 探究基质细胞衍生因子1α(stromal cell-derived factor 1α, SDF-1α)对软骨细胞凋亡及自噬的影响及其潜在机制。方法 从新生小鼠的膝关节中分离提取软骨细胞，以0（对照组）、50、100和200 ng/mL的SDF-1α刺激软骨细胞，CCK-8实验检测SDF-1α刺激24 h、48 h、72 h对软骨细胞活性的影响，划痕实验检测SDF-1α刺激12 h、24 h对软骨细胞迁移能力的影响，Western blot实验测定SDF-1α作用后软骨细胞内Akt信号通路相关蛋白表达变化。以0（对照组）、200 ng/mL的SDF-1α刺激软骨细胞，流式细胞术检测SDF-1α对软骨细胞凋亡的影响，透射电镜下检测SDF-1α对软骨细胞自噬的影响，并利用免疫荧光染色实验直观显示SDF-1α作用后软骨细胞内p-Akt蛋白表达及分布的差异。结果 与对照组相比，50、100和200 ng/mL SDF-1α在各时点并不降低软骨细胞活性（P<0.01），且均能在24 h促进软骨细胞迁移（P<0.05）。Western blot实验结果显示，与对照组相比，50、100和200 ng/mL SDF-1α能够显著上调软骨细胞内p-Akt的蛋白表达量，Akt表达量未见明显差异。与对照组相比，流式细胞术示SDF-1α能够抑制软骨细胞凋亡（P<0.05），透射电镜观察到SDF-1α促进软骨细胞自噬（P<0.05），免疫荧光染色实验结果显示，p-Akt在软骨细胞的表达主要集中在细胞核周，SDF-1α作用后软骨细胞内p-Akt表达进一步在细胞核周部位增强。结论 SDF-1α通过激活Akt信号通路，抑制软骨细胞凋亡，促进软骨细胞迁移和自噬。

关键词

基质细胞衍生因子1α / 软骨细胞 / 凋亡 / Akt / 自噬