四川地区血源性热带念珠菌分子流行病学研究及氟康唑耐药机制初探

摘要

目的 对血流感染来源的热带念珠菌分离株的分子流行病学进行分析，并初步探索其存在的耐药机制。方法 收集四川大学华西医院以及四川省其他医院血流感染来源的热带念珠菌临床分离株，对其进行基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱鉴定，以及抗真菌药物敏感性试验。采用一代测序技术对分离株进行多位点序列分型（multilocus sequence typing, MLST）；对耐药相关基因进行测序，探索存在的突变位点；采用RT-qPCR技术检测和分析耐药相关基因的相对表达量。结果 共收集到39株血流感染热带念珠菌分离株。MLST系统发育树显示大部分在系统发育树中聚集的菌株，其最小抑菌浓度（minimal inhibitory concentration, MIC ）相同或相近。所有MLST型在PubMLST数据库中均未能匹配，为新的二倍体序列类型。检测到ERG11含有3个有义突变，分别是Ser154Phe、Tyr132Phe、Tyr257His，并仅存于耐药株中。UPC2含有4个有义突变，分别是Ala251Thr、Gln289Leu、Ser279Glu和Gln313His，也仅存于耐药株中，其中Ser279Glu和Gln313His未见文献报道；ERG3存在2个有义突变，分别是Ser112Gly和Ala48Ser，未见文献报道，其中Ser112Gly仅见于耐药株中。非敏感（MIC>2 mg/L）组ERG11(14.48 vs.7.109, P=0.003)和UPC2(1.922 vs.0.832, P=0.04)的表达量高于敏感（MIC≤2mg/L）组。结论 四川地区的热带念珠菌可能存在独特的遗传关系，并且氟康唑对热带念珠菌的MIC值高低与分子分型相关。ERG11突变是热带念珠菌耐氟康唑的主要机制。ERG11和UPC2的上调与热带念珠菌对氟康唑耐药相关。

关键词

热带念珠菌 / 氟康唑 / 耐药机制 / 分子流行病学

基金资助

国家科技重大项目（No.2020AAA0109405）资助