红景天苷通过调控miR-1343-3p/SOX18信号轴抑制胃癌细胞增殖

摘要

目的 研究红景天苷通过上调miR-1343-3p抑制胃癌细胞增殖的分子作用机制。方法 通过RNA数据库筛选与miR-1343-3p相关，且在红景天苷作用人胃癌细胞后表达水平显著变化的肿瘤增殖相关mRNA；基因比对及RNA结合蛋白免疫共沉淀分析miR-1343-3p与SOX18的关联性；免疫细胞化学法检测SOX18蛋白的定位；CCK-8检测红景天苷对人胃癌细胞（MGC-803、AGS）增殖的影响；将人胃癌细胞分为空白对照组和低、高剂量红景天苷组，实时荧光定量PCR（qPCR）检测miR-1343-3p和SOX18 mRNA的表达，蛋白质免疫印迹法检测SOX18蛋白表达；miR-1343-3p模拟物（miR-1343-3p mimic）、miR-1343-3p抑制剂（miR-1343-3p inhibitor）分别经Lipofectamine^TM 2000脂质体共转染胃癌细胞，qPCR检测miR-1343-3p和SOX18 mRNA的表达，蛋白质免疫印迹法检测SOX18蛋白表达。结果 生物信息学分析筛选获得miR-1343-3p下游mRNA为SOX18，基因比对验证了两者之间具有明确的结合位点，RNA结合蛋白免疫共沉淀验证了两者间存在靶向关系（P<0.05）；免疫细胞化学实验显示SOX18蛋白在核表达；CCK-8实验证明红景天苷明显抑制胃癌细胞的增殖且与作用时间和药物浓度呈现一定的依赖性；与空白对照组相比，红景天苷作用后胃癌细胞中SOX18 mRNA和蛋白表达均减少（P<0.05）,miR-1343-3p表达增加（P<0.05）；与Control组相比，miR-1343-3p mimic组胃癌细胞中miR-1343-3p的表达升高、SOX18 mRNA和蛋白表达降低，miR-1343-3p inhibitor组胃癌细胞中miR-1343-3p的表达降低、SOX18 mRNA和蛋白表达升高（均P<0.05）。结论 红景天苷可能通过调控miR-1343-3p/SOX18信号轴抑制胃癌细胞增殖，这些调节因子有望成为胃癌新的潜在治疗靶点或生物标志物。

关键词

胃癌 / 红景天苷 / miR-1343-3p / SOX18