肿瘤坏死因子α诱导滋养细胞NOD1-RICK-NF-κB信号轴激活与炎症因子释放

摘要

目的 解析核苷酸结合寡聚化结构域1(nucleotide-binding oligomerization domain 1, NOD1)在妊娠早期和晚期的母胎界面细胞表达差异及其介导炎症反应的分子机制。方法 通过免疫组化（IHC）和逆转录PCR(RT-PCR)检测30例正常早孕绒毛、30例正常早孕蜕膜及30例正常足月胎盘组织中NOD1的mRNA和蛋白的表达；用不同质量浓度（0、0.01、0.1、1、10和100 ng/mL）和不同刺激时间（24、48和72 h）的肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor-alpha, TNFα）刺激人绒毛膜滋养细胞HTR8/SVneo细胞，通过实时荧光定量PCR(q RT-PCR)、Western blot检测NOD1、受体结合丝氨酸苏氨酸激酶2[receptor-interacting protein(RIP)-like interacting CLARP kinase, RICK]以及p65的表达差异，ELISA分析炎症因子IL-6、IL-8分泌水平，并用EMSA检测核因子κB(nuclear factor-kappa B, NF-κB)的DNA结合活性，从而探讨滋养细胞内NOD1信号转导通路的调控机制。结果 NOD1在正常早孕绒毛、蜕膜以及足月胎盘组织中均有表达，主要表达于滋养细胞、血管内皮细胞以及蜕膜细胞的胞浆，NOD1在足月胎盘和早孕绒毛、蜕膜组织中的表达差异具有统计学意义（P<0.05），足月胎盘NOD1表达高于早孕绒毛和蜕膜组织。TNFα上调了HTR8/SVneo细胞中NOD1的表达，且呈现剂量依赖性和时间依赖性。同时，IL-6的分泌水平与TNFα质量浓度呈正相关，而IL-6和IL-8的释放呈现TNFα刺激时间依赖性。此外，TNFα刺激增强了RICK和p65的表达，并提高了NF-κB的DNA结合活性。结论 NOD1持续表达于正常妊娠母胎界面的滋养细胞及蜕膜细胞内，参与了正常妊娠过程的调控。NOD1表达变化与TNFα诱导的炎症反应存在关联，TNFα可能通过NOD1-RICK-NF-κB信号轴触发炎症因子释放，介导滋养细胞的炎症级联反应，为深入理解妊娠期免疫调控机制提供了新的见解。

关键词

NOD1 / 固有免疫 / 妊娠 / 滋养层

基金资助

国家重点研发计划（No.2018YFC1004600、No.2018YFC1004603）资助