西藏凹乳芹乙醇提取物通过HO-1/Nrf2和Myd88/AKT/PI3K信号通路改善大鼠慢性萎缩性胃炎

摘要

目的 研究西藏凹乳芹乙醇提取物（Vicatia thibetica de Boiss., VTDB）对N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍（NMethyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine, MNNG）诱导的大鼠慢性萎缩性胃炎（chronic atrophic gastritis, CAG）的改善作用，并初步探索其作用机制。方法 采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱联用技术（UPLC-Q-TOF-MS）对VTDB进行化学成分分析。采用MNNG诱导联合饥饱失常法的方式，建立大鼠CAG模型。将72只健康雄性SD大鼠随机分为6组，分别为正常对照组、模型组、VTDB低剂量组[157 mg/(kg·d)]、VTDB中剂量组[314 mg/(kg·d)]、VTDB高剂量组[628 mg/(kg·d)]以及阳性对照（维酶素）组[216 mg/(kg·d)]，每组12只。HE染色观察各组大鼠胃黏膜病理情况，ELISA测定血清中胃消化酶原Ⅰ（pepsinogenⅠ, PGⅠ）、胃消化酶原Ⅱ（pepsinogenⅡ, PGⅡ）、炎症因子（TNF-α、IL-6、IL-10）的水平，测定各组大鼠胃组织中的丙二醛（malondialdehyde, MDA）的水平与超氧化物歧化酶（superoxide dismutase, SOD）的活力，Western bolt测定胃组织中血红素氧合酶1(heme oxygenase-1, HO-1)/核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid-2-related actor 2, Nrf2)及髓样分化因子88(myeloid differentiation primary response protein 88, MyD88)/蛋白激酶B(protein kinase B, AKT)/磷脂酰肌醇3-激酶（phosphatidylinositide 3-kinases, PI3K）信号通路蛋白的表达水平。结果 通过比对保留时间及质谱裂解规律，并结合ESI（±）-MS/MS数据库匹配，从VTDB中共鉴定出89个化学成分，主要包括脂肪酸类、酚酸类及香豆素类化合物。HE染色结果提示VTDB能一定程度上改善CAG大鼠胃黏膜的损伤。ELISA结果显示，与模型组相比，VTDB给药组的大鼠血清中PGⅠ、PGⅡ水平和PGR(PGⅠ/PGⅡ)提升（P<0.05），胃泌素17(gastrin 17, G-17)水平降低（P<0.05）;VTDB低、中、高剂量组血清TNF-α,VTDB低、高剂量组血清IL-6的分泌下降（P<0.05）,VTDB高剂量组血清IL-10的分泌增加（P<0.001）;VTDB中、高剂量组大鼠胃组织中MDA水平降低（P<0.01）,VTDB低、中、高剂量组SOD酶活力增加（P<0.05）。Western bolt结果显示，VTDB高剂量组HO-1,VTDB低、中、高剂量组Nrf2水平均升高（P<0.001）,VTDB低、高剂量组MyD88,VTDB中、高剂量组AKT、PI3K水平均下降（P<0.05），表明VTDB能够影响HO-1/Nrf2与MyD88/AKT/PI3K信号通路蛋白的表达。结论 VTDB通过影响HO-1/Nrf2与MyD88/AKT/PI3K信号通路，从而抑制脂质过氧化与炎症过程，进而改善CAG大鼠的胃部损伤和炎症。

关键词

西藏凹乳芹乙醇提取物 / 化学成分分析 / 慢性萎缩性胃炎 / 保护作用