利用Transwell膜孔筛选高质量精子及其性能评估

摘要

目的 基于Transwell膜孔的分子筛作用,探讨利用Transw ell优选人类高质量精子的可行性。方法 收集2023年11月-2024年5月广州中医药大学第一附属医院男科新鲜精液标本162份。分析经5μm和8μm孔径Transwell精子优选的差异并经透射电子显微镜（transmission electron micro scope,TEM）观察微观结构差异,比较Transwell优选精子30 min、60 min、80 min后精液参数的变化,比较Transwell与密度梯度离心法（density gradient centrifugation,DGC）和上游法（swim-up methods,SU）对不同质量精子优化后精液参数的差异。本研究将精子前向运动（progressive motility,PR）百分率设定为主要结局指标,精子活力、正常精子形态率（normal sperm morpholo gy rate,NSMR）、DNA碎片指数（DNA fragmentation index,DFI）、精子浓度及回收率设定为次要结局指标。结果 当孔径为5μm、优选时间为60 min时,Transwell优选精子效果更佳。在正常精液组中,与DGC法相比,Transw ell优选后的精子PR百分率中位数从77.50%升至92.05%（P<0.05）,NSMR中位数从9.00%升至13.25%（P<0.01）,DFI中位数从2 16%降至0.25%（P<0.01）;与SU法相比,Transwell优选后的精子浓度中位数从4.70×10～6 mL^-1升至14.15×10～6 mL^-1（P<0.01）,DFI中位数从0.47%降至0.25%（P<0.01）,回收率中位数从2.50%升至6.48%（P<0.01）,但精子活力、PR百分率和NSMR差异无统计学意义。在异常精液组中,与DGC法相比,Transwell优选后的精子PR百分率中位数由37.20%升至88.75%（P<0.01）,精子活力中位数由53.00%升至95.00%,DFI中位数由12.49%降至0.92%（P<0.01）;与SU法相比,Transwell优选后的精子PR百分率中位数由86 3 0%升至88.75%（P<0.05）,DFI中位数由1.63%降至0.92%（P<0.01）。结论 Transwell优选方法在获得足够数量、活力高、形态良好以及DNA完整性较佳的精子方面表现出较好性能。这种特性使其有望成为辅助生殖技术中精选高质量精子的简便实用方法。

关键词

辅助生殖技术 / 精子 / 精子活力 / DNA碎片 / Transwell