hsa＿circRNA＿0000596促进宫颈癌细胞侵袭和转移的机制研究

摘要

目的 探讨hsa＿circRNA＿000596（circ-596）促进宫颈癌细胞侵袭和转移的作用机制。方法 收集69例宫颈鳞状细胞癌（CSCC）手术患者的CSCC组织、癌旁正常宫颈组织及临床资料。采用RNA原位杂交（RISH）技术检测circ-596阳性表达情况，并分析其与CSCC患者临床特征的关系。采用Transwell实验检测宫颈癌细胞的侵袭能力；采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）实验检测circ-596对下游靶基因的影响；采用双荧光素酶报告基因实验验证miR-197-3p对下游靶基因RNF146的调控作用；采用Rescue实验分析circ-596对miR-197-3p/RNF146信号通路及细胞侵袭能力的影响。结果 circ-596在CSCC组织中主要呈阳性表达，阳性表达率为63.77%（44/69）,高于癌旁正常组织的17.39%（12/69）,差异有统计学意义（χ²=8.254,P=0.004）。circ-596阳性表达与肿瘤分化程度、淋巴结转移均密切相关（P<0.05）。Transwell实验结果显示，与对照细胞相比，过表达circ-596的宫颈癌细胞侵袭数目增加，敲低circ-596表达的细胞侵袭数目减少，差异均有统计学意义（P<0.05）。生物信息学预测结果显示，miR-197-3p是circ-596的下游靶基因，RNF146是miR-197-3p的下游靶基因。qRT-PCR实验结果显示，过表达circ-596能下调miR-197-3p的表达，降低circ-596表达能上调miR-197-3p的表达，差异有统计学意义（P<0.05）。双荧光素酶报告基因实验结果显示，miR-197-3p与RNF146基因的3′UTR结合，从而抑制荧光素酶相对活性。Rescue实验结果显示，circ-596能够抑制miR-197-3p的表达，进而促进RNF146的表达，提升宫颈癌细胞的侵袭能力。结论 CSCC组织中circ-596主要呈阳性表达，且其阳性表达情况与肿瘤分化程度和淋巴结转移密切相关。circ-596通过结合miR-197-3p,促进RNF146的表达，进而促进宫颈癌细胞的侵袭和转移。

关键词

宫颈鳞状细胞癌 / hsa＿circRNA＿0000596 / 微小RNA-197-3p / RNF146基因 / 侵袭 / 转移

基金资助

江苏省中医药科技发展计划项目(ZD202330)