右美托咪定介导miR-182-5p/BDNF改善肝叶切除术后大鼠早期认知功能障碍的机制研究

摘要

目的 探讨右美托咪定(DEX)通过调控微小RNA-182-5p/脑源性神经营养因子(miR-182-5p/BDNF)轴对肝叶切除术后大鼠早期认知功能障碍的影响。方法 将60只无特定病原体(SPF)级SD雄性大鼠随机分为对照组、模型组、DEX低剂量组(25μg/kg)、DEX中剂量组(50μg/kg)、DEX高剂量组(100μg/kg)和DEX+miR-182-5p模拟剂组，每组10只。模型组大鼠吸入七氟醚麻醉后行部分肝叶切除术；DEX低、中、高剂量组大鼠预先通过腹腔注射25、50、100μg/kg DEX,30 min后吸入七氟醚麻醉后行部分肝叶切除术；DEX+miR-182-5p模拟剂组大鼠处理方法同DEX高剂量组，术后每2 d通过尾静脉注射miR-182-5p模拟剂(50μg);对照组大鼠通过腹腔注射2 mL/kg生理盐水，并吸入七氟醚进行麻醉2 h。采用Morris水迷宫试验与神经功能缺损评估量表(NSS)评估各组大鼠的术后认知功能与神经功能损伤。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)测定大鼠海马组织中miR-182-5p的水平。采用蛋白质免疫印迹法测定大鼠海马组织中BDNF的蛋白表达水平。采用生物信息学分析miR-182-5p与BDNF的3′UTR的结合区域，并利用双荧光素酶报告基因实验检测miR-182-5p与BDNF的靶向关系。结果 与对照组相比，模型组大鼠术后2～5 d的Morris水迷宫测试逃避潜伏期延长，术后1、3、7 d的NSS评分升高；与模型组相比，DEX治疗组大鼠术后2～5 d的Morris水迷宫测试逃避潜伏期缩短，术后3、7 d的NSS评分降低，且呈剂量依赖性；与DEX高剂量组相比，DEX+miR-182-5p模拟剂组术后2～5 d的Morris水迷宫测试逃避潜伏期延长，术后3、7 d的NSS评分升高；与对照组相比，模型组大鼠术后海马组织中miR-182-5p水平升高，BDNF水平降低；与模型组相比，DEX治疗组大鼠术后海马组织中miR-182-5p水平降低，BDNF水平升高，且呈剂量依赖性；与DEX高剂量组相比，DEX+miR-182-5p模拟剂组术后海马组织中miR-182-5p水平升高，BDNF水平降低；上述组间差异均有统计学意义(P<0.05)。双荧光素酶报告基因试验验证了miR-182-5p与BDNF的靶向结合。结论 DEX通过抑制miR-182-5p提高BDNF水平，改善肝叶切除术后大鼠的早期认知功能障碍。

关键词

右美托咪定 / 微小RNA-182-5p / 脑源性神经营养因子 / 肝叶切除术 / 术后认知功能障碍