微小RNA-146a保护脑出血大鼠神经的调控机制

摘要

目的 探讨微小RNA-146a(miR-146a)靶向调控E盒锌指蛋白1基因(ZEB1)表达及其在脑出血大鼠模型中参与神经保护和抑制细胞自噬的相关分子机制。方法 将8周龄雄性SD大鼠40只随机分为4组，分别为假手术组、模型组、miR-146a过表达组和miR-146a低表达组，每组10只。除了假手术组，其他3组采用Ⅶ型胶原酶诱导法建立动脉瘤性自发性脑出血大鼠模型。4组大鼠均基于高盐饮食饲养6周，继续饲养20周后处死。比较4组大鼠的神经功能[改良神经严重程度评分(mNSS)]、脑含水量。采用FJC染色检测退变神经元数量；采用TUNEL染色检测细胞凋亡；采用苏木精-伊红(HE)染色观察脑组织病理变化；采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-146a和ZEB1 mRNA表达；采用蛋白质印迹(Western blot)检测ZEB1、自噬相关蛋白人重组自噬效应蛋白(Beclin 1)和微管相关蛋白1轻链3(LC3)表达。结果 与假手术组比较，模型组的mNSS评分、脑含水量、退变神经元数量和细胞凋亡率增加，miR-146a表达量降低，ZEB1 mRNA以及ZEB1、Beclin 1和LC3蛋白表达升高，差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较，miR-146a过表达组的mNSS评分、脑含水量、退变神经元数量和细胞凋亡率下降，miR-146a表达量升高，ZEB1 mRNA以及ZEB1、Beclin 1和LC3蛋白表达降低，差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较，miR-146a低表达组的mNSS评分、脑含水量、退变神经元数量和细胞凋亡率增加，而miR-146a表达量降低，ZEB1 mRNA以及ZEB1、Beclin 1和LC3蛋白表达升高，差异有统计学意义(P<0.05)。结论 上调miR-146a可通过靶向抑制ZEB1基因及其蛋白表达，以及调控细胞自噬活性，进而发挥神经保护作用。

关键词

脑出血 / 神经保护 / 微小RNA-146a / E盒锌指蛋白1基因 / 自噬