LINC00657对氧糖剥夺诱导的小鼠海马神经元细胞损伤的影响及机制研究

摘要

目的 探讨LINC00657对氧糖剥夺(OGD)诱导的小鼠海马神经元细胞损伤的影响及作用机制。方法 对小鼠海马神经元细胞HT22进行OGD处理，建立损伤模型，将正常培养的HT22细胞作为对照；将si-NC、si-LINC00657、微小RNA(miR)-NC、miR-224-3p mimics分别转染至HT22细胞，然后进行OGD处理；向HT22细胞共转染si-LINC00657和anti-miR-NC,或共转染si-LINC00657和anti-miR-224-3p,然后进行OGD处理。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测LINC00657、miR-224-3p相对表达量；采用CCK-8法、流式细胞术分别检测细胞存活率、细胞凋亡率；采用试剂盒检测乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)水平；采用双荧光素酶报告基因实验检测miR-224-3p过表达对野生型LINC00657载体(WT-LINC00657)、突变型LINC00657载体(MUT-LINC00657)荧光素酶活性的影响。结果 与对照细胞相比，OGD诱导的HT22细胞中LINC00657表达上调，miR-224-3p表达下调，差异有统计学意义(P<0.05);分别与转染si-NC或转染miR-NC相比，转染si-LINC00657或转染miR-224-3p mimics后，细胞存活率、SOD活性和GSH-Px活性升高，细胞凋亡率、LDH活性和MDA水平降低，差异有统计学意义(P<0.05); miR-224-3p过表达降低了WT-LINC00657的荧光素酶活性，差异有统计学意义(P<0.05);与共转染si-LINC00657和anti-miR-NC的细胞相比，共转染si-LINC00657和anti-miR-224-3p的细胞存活率降低，细胞凋亡率升高，LDH活性、MDA水平升高，SOD、GSH-Px活性降低，差异有统计学意义(P<0.05)。结论 干扰LINC00657可通过上调miR-224-3p而促进细胞增殖，并抑制细胞凋亡和氧化应激反应，从而减轻OGD诱导的小鼠海马神经元细胞损伤。

关键词

海马神经元细胞 / 氧糖剥夺 / LINC00657 / 微小RNA-224-3p / 细胞增殖 / 细胞凋亡 / 氧化应激