电刺激迷走神经对脓毒症小鼠肠道通透性的作用及机制研究

摘要

目的 探讨电刺激迷走神经对脓毒症小鼠肠道通透性的作用及机制。方法 将50只C57BL/6小鼠随机分为对照组(CON组)、脓毒症组[脂多糖(LPS)组]、迷走神经切断组(VGX组)、电刺激迷走神经组(STM组)、α-银环蛇毒素(α-BGT)组，每组10只。LPS组、VGX组、STM组、α-BGT组均腹腔注射10 mg/kg LPS制备脓毒症模型，CON组则腹腔注射等体积生理盐水。CON组、LPS组仅暴露双侧颈迷走神经，VGX组、STM组、α-BGT组均切断双侧颈迷走神经，STM组电刺激左颈迷走神经，α-BGT组皮下注射α-BGT后再电刺激左颈迷走神经。处死各组小鼠后取回肠组织，光镜下进行组织病理学观察，评估肠道组织通透性，并检测紧密连接蛋白(ZO-1、claudin-2)、肌球蛋白轻链激酶(MLCK)和核因子-κB(NF-κB)蛋白相对表达量。结果 LPS组小鼠回肠组织肠黏膜上皮细胞损伤严重，微绒毛坏死、脱落，大量炎性细胞浸润，VGX组回肠组织病理学改变程度较LPS组加重，STM组回肠组织病理学改变程度较LPS组、VGX组减轻，α-BGT组肠黏膜上皮细胞损伤最严重。与CON组比较，LPS组、VGX组小鼠肠上皮组织通透性均增加，差异有统计学意义(P<0.05);与LPS组、VGX组比较，STM组小鼠肠上皮组织通透性降低，差异有统计学意义(P<0.05);与STM组比较，α-BGT组小鼠肠上皮组织通透性增加，差异有统计学意义(P<0.05)。LPS组、VGX组小鼠肠上皮组织中ZO-1、claudin-2蛋白相对表达量低于CON组，STM组小鼠肠上皮组织中ZO-1、claudin-2蛋白相对表达量高于LPS组、VGX组，α-BGT组小鼠肠上皮组织中ZO-1、claudin-2蛋白相对表达量低于STM组，差异均有统计意义(P<0.05)。LPS组、VGX组小鼠肠上皮组织中MLCK、NF-κB蛋白相对表达量高于CON组，STM组小鼠肠上皮组织中MLCK、NF-κB蛋白相对表达量低于LPS组、VGX组，α-BGT组小鼠肠上皮组织中MLCK、NF-κB蛋白相对表达量高于STM组，差异均有统计意义(P<0.05)。结论 电刺激迷走神经有助于保护脓毒症小鼠的肠道屏障功能，其潜在机制或与激活胆碱能抗炎通路，进而抑制炎症反应相关。

关键词

电刺激 / 迷走神经 / 脂多糖 / ZO-1蛋白 / claudin-2蛋白 / α-银环蛇毒素 / 胆碱能抗炎通路