肿瘤相关成纤维细胞中微小RNA-214-3p表达对卵巢癌细胞顺铂敏感性的影响

摘要

目的 探讨肿瘤相关成纤维细胞（CAFs）中微小RNA-214-3p（miR-214-3p）表达对卵巢癌细胞顺铂敏感性的影响及其作用机制。方法 选取64例卵巢癌患者作为研究对象，根据化疗后无进展生存期分为铂部分敏感组和铂敏感组，采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测2组患者卵巢癌组织中miR-214-3p相对表达量，比较不同临床特征患者的2年生存率；原代培养CAFs及正常卵巢成纤维细胞（NFs）,采用qRT-PCR、免疫荧光实验检测CAFs和NFs中miR-214-3p、p62蛋白表达；通过CSIOVDB数据库检索SQSTM1基因在不同种类卵巢细胞中的表达水平；向CAFs瞬时转染miR-214-3p mimic（mimic组）和miR-214-3p mimic NC（NC组）,将未转染CAFs设为对照组；留取各组细胞培养上清，建立卵巢癌细胞SKOV3与各组CAFs间接共培养模型，采用CCK-8法、DCFH-DA法、qRT-PCR及免疫印迹法分别检测不同培养条件下SKOV3细胞增殖率、顺铂半数抑制浓度(IC₅₀)、细胞活性氧（ROS）含量和miR-214-3p、顺铂耐药基因CCND1、自噬蛋白p62相对表达量。结果 铂部分敏感组患者的miR-214-3p相对表达量低于铂敏感组，差异有统计学意义（P<0.01）;不同国际妇产科联盟（FIGO）分期、铂部分敏感情况、miR-214-3p低表达情况患者的2年生存率比较，差异有统计学意义（P<0.01）;卵巢CAFs中miR-214-3p相对表达量低于NFs, p62蛋白表达水平高于NFs,差异有统计学意义（P<0.01）; CSIOVDB数据库在线分析显示，卵巢癌CAFs中的SQSTM1基因表达水平高于卵巢癌上皮细胞、NFs,差异有统计学意义（P<0.01）;相较于与对照组CAFs、NC组CAFs间接共培养的SKOV3细胞，与mimic组CAFs间接共培养的SKOV3细胞的增殖率、顺铂IC₅₀、ROS含量降低，miR-214-3p相对表达量升高，CCND1 mRNA和p62蛋白相对表达量降低，差异有统计学意义（P<0.01）。结论 CAFs中miR-214-3p表达与卵巢癌细胞对顺铂的敏感性相关，CAFs中miR-214-3p低表达可促进卵巢癌细胞增殖及ROS介导的自噬，进而降低卵巢癌细胞对顺铂的敏感性。

关键词

肿瘤相关成纤维细胞 / 微小RNA-214-3p / 自噬 / 上皮性卵巢癌 / 顺铂 / 耐药

基金资助

国家自然科学基金青年科学基金项目(81603138)