长链非编码RNA GHRLOS2在结直肠癌中的表达及作用机制

摘要

目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA)GHRLOS2在结直肠癌组织和细胞中的表达及作用机制。方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测结直肠癌组织或细胞中GHRLOS2、微小RNA-33b-5p(miR-33b-5p)表达水平。构建过表达GHRLOS2的结直肠癌细胞系HCT116、SW480,通过划痕实验、Transwell实验检测过表达GHRLOS2对HCT116、SW480细胞迁移和侵袭能力的影响；使用葡萄糖检测试剂盒检测过表达GHRLOS2细胞及对照细胞内的葡萄糖含量；采用蛋白质印迹法(Western blot)检测细胞中PCK1蛋白表达水平；基于生物信息学方法预测miR-33b-5p与PCK1的靶向结合关系。结果 qRT-PCR检测结果显示，结直肠癌组织样本中的GHRLOS2表达水平低于癌旁组织，结直肠癌细胞中的GHRLOS2表达水平低于正常结肠上皮细胞，差异有统计学意义(P<0.05); GHRLOS2表达与Grade分级、Stage分期、淋巴结转移均相关(P<0.05)。结直肠癌组织的miR-33b-5p表达水平高于对应癌旁组织，差异有统计学意义(P<0.001)。划痕实验、Transwell实验、葡萄糖含量检测结果显示，过表达GHRLOS2可显著抑制结直肠癌细胞的侵袭、迁移和葡萄糖代谢。过表达GHRLOS2可抑制miR-33b-5p表达水平；GHRLOS2是miR-33b-5p的分子海绵，PCK1是miR-33b-5p的靶标；过表达GHRLOS2可竞争性结合miR-33b-5p,促进PCK1表达增加。结论 GHRLOS2在结直肠癌组织和细胞中表达下调，其可能通过miR-33b-5p/PCK1途径调节结直肠癌细胞的侵袭、迁移及葡萄糖代谢能力，GHRLOS2有望成为结直肠癌靶向治疗的潜在生物靶点。

关键词

结直肠癌 / 长链非编码RNA GHRLOS2 / PCK1蛋白 / 微小RNA-33b-5p / 糖代谢

基金资助

2021年度河南省科技攻关计划项目(212102310785); 2022年度河南省科技攻关项目(222102310146)