hsa＿circ＿0013058促进食管鳞状细胞癌侵袭和迁移的机制研究

摘要

目的 探讨食管鳞状细胞癌（ESCC）中hsa＿circ＿0013058的作用及其促进ESCC细胞侵袭和迁移的机制。方法 收集75例患者的ESCC组织及癌旁正常组织。采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）和RNA原位杂交技术（RISH）检测hsa＿circ＿0013058表达情况，并分析其与ESCC患者临床病理资料的关系。采用划痕实验和Transwell实验检测ESCC细胞侵袭和迁移能力。采用生物信息学方法预测hsa＿circ＿0013058的靶基因。采用Rescue实验检测hsa＿circ＿0013058对下游基因的调控及对ESCC细胞侵袭、迁移的影响。结果 qRT-PCR结果显示，ESCC组织中hsa＿circ＿0013058表达量高于癌旁正常组织，差异有统计学意义（t=5.078,P<0.05）。ESCC细胞株KYSE70中hsa＿circ＿0013058表达量高于人正常食管上皮细胞Het-1A,差异有统计学意义（P<0.05）。在RNA水平上，hsa＿circ＿0013058与miR-548p呈负相关（r=-0.254 2,P<0.05）。ESCC组织中，hsa＿circ＿0013058 RNA阳性表达率为72.00%,高于癌旁正常组织的17.33%,差异有统计学意义（χ²=6.862,P<0.05）。hsa＿circ＿0013058阳性表达与肿瘤浸润深度、分化程度和淋巴结转移均密切相关（P<0.05）。划痕实验结果表明，过表达hsa＿circ＿0013058增强KYSE70细胞的迁移能力（P<0.05）;敲低hsa＿circ＿0013058表达减弱KYSE70细胞的迁移能力（P<0.05）。过表达hsa＿circ＿0013058后，ESCC细胞侵袭和迁移细胞数目增加，敲低hsa＿circ＿0013058表达后，侵袭和迁移细胞数目下降（P<0.05）。qRT-PCR实验证实，hsa＿circ＿0013058可调控微小RNA-548p（miR-548p）表达。双荧光素酶报告基因实验表明，miR-548p与LPAR3为特异性结合，LPAR3是miR-548p的直接靶基因。Rescue实验结果表明，hsa＿circ＿0013058通过miR-548p/LPAR3信号轴调控ESCC细胞的侵袭、转移。结论 ESCC中，hsa＿circ＿0013058抑制miR-548p表达，进而激活LPAR3信号通路，促进ESCC细胞的侵袭、迁移。

关键词

食管鳞状细胞癌 / hsa＿circ＿0013058 / 微小RNA-548p / LPAR3基因 / 侵袭 / 迁移