微小RNA-148a-3p靶向核心1β13-半乳糖基转移酶1增强肺腺癌细胞的放疗敏感性的研究

摘要

目的 探讨微小RNA-148a-3p(miR-148a-3p)在肺腺癌中的表达及临床意义，分析miR-148a-3p靶向蛋白核心1β13-半乳糖基转移酶1(C1GALT1)对肺腺癌细胞放疗敏感性的影响及机制。方法 选取肺腺癌组织芯片中76例患者肿瘤组织及肺腺癌A549细胞株为研究对象。对组织芯片分别进行miR-148a-3p原位杂交(ISH)染色和C1GALT1免疫组织化学染色，分析76例肺腺癌患者肿瘤组织中miR-148a-3p的表达与临床病理、预后及C1GALT1表达的关系。采用细胞转染技术对A549细胞进行miR-148a-3p过表达质粒的转染；转染细胞接受2 Gy放疗后采用克隆形成实验检测细胞的放疗敏感性；采用蛋白质印迹法检测细胞C1GALT1蛋白表达水平；采用双荧光素酶报告基因实验验证miR-148a-3p与C1GALT1的靶向调控关系；采用共转染技术分析miR-148a-3p调控A549细胞放疗敏感性的机制。结果 76例肺腺癌组织中低表达miR-148a-3p与患者淋巴结转移显著相关(P=0.012); miR-148a-3p高表达者预后显著优于miR-148a-3p低表达者(P=0.005);肺腺癌组织中miR-148a-3p与C1GALT1的表达呈显著负相关(P=0.023)。多因素分析显示，miR-148a-3p低表达、T分期及淋巴结转移是预后的独立危险因素。克隆形成实验显示，过表达miR-148a-3p组克隆形成数显著低于对照组(P<0.001); Western Blot结果显示，miR-148a-3p过表达可以显著下调细胞中C1GALT1蛋白水平(P<0.001)。双荧光素酶报告基因实验显示miR-148a-3p通过结合C1GALT1的3′UTR来调控C1GALT1的表达。功能拯救试验显示C1GALT1能够部分抵消miR-148a-3p的放疗增敏效应。结论 肺腺癌中miR-148a-3p低表达与淋巴结转移、C1GALT1高表达及预后不良显著相关，miR-148a-3p通过负调控C1GALT1的表达增强肺腺癌细胞的放疗敏感性。

关键词

微小RNA-148a-3p / 核心1β13-半乳糖基转移酶1 / 肺腺癌 / 放疗敏感性 / 预后

基金资助

江苏省自然科学基金项目(BK20191218); 江苏省扬州市社会发展项目(YZ2021081); 直线加速器的数据验证与性能评价(BY20221106)