circ＿0114427靶向微小RNA-330-5p调控脂多糖诱导的肺泡上皮细胞凋亡及炎症反应

摘要

目的 探讨circ＿0114427对脂多糖(LPS)诱导的肺泡上皮细胞凋亡和炎症的影响及其机制。方法 体外培养人肺泡上皮细胞，分别转染si-circ＿0114427、微小RNA(miR)-330-5p mimics或共转染si-circ＿0114427与anti-miR-330-5p后，用10 mg/L LPS处理24 h。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测细胞中circ＿0114427和miR-330-5p表达量；采用蛋白免疫印迹评估活化的天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(Cleaved-caspase3)和活化的天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-9(Cleaved-caspase9)蛋白水平；采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达；采用流式细胞术分析细胞凋亡。采用双荧光素酶报告实验验证circ＿0114427和miR-330-5p的互作关系。结果 肺泡上皮细胞经LPS处理后，细胞中circ＿0114427表达升高，miR-330-5p表达降低(P<0.05)。敲减circ＿0114427或上调miR-330-5p可以抑制LPS诱导的肺泡上皮细胞凋亡、Cleaved-caspase3、Cleaved-caspase9表达以及IL-6和TNF-α水平(P<0.05)。circ＿0114427靶向结合并负调控miR-330-5p。miR-330-5p下调可以逆转circ＿0114427敲低对LPS诱导的细胞凋亡和炎症的抑制作用。结论 敲减circ＿0114427可抑制LPS诱导的肺泡上皮细胞凋亡和炎症，这可能与miR-330-5p上调有关。

关键词

肺泡上皮细胞 / circ＿0114427 / 微小RNA-330-5p / 细胞凋亡 / 炎症