补中益气汤含药血清抑制肺癌细胞活性及血管生成拟态的机制研究

摘要

目的 探讨补中益气汤含药血清对肺癌细胞活性及血管生成拟态（VM）的影响及机制。方法 通过SD大鼠灌胃法制备低剂量（BZ-L组）、中等剂量（BZ-M组）、高剂量（BZ-H组）补中益气汤含药血清，进行肺癌细胞干预。通过CCK-8实验、Edu细胞增殖实验、细胞克隆形成实验及细胞划痕实验、Transwell实验检测补中益气汤对肺癌A549、HCC827细胞增殖及迁移的影响。采用流式细胞术检测补中益气汤对肺癌细胞凋亡和细胞周期的影响，通过体外VM实验检测补中益气汤对肺癌细胞血管生成的影响。通过RNA-seq测序检测对照组细胞与药物干预细胞的差异表达基因。构建小鼠皮下移植瘤，检测补中益气汤灌胃治疗对肺癌细胞体内生长的抑制作用。结果 补中益气汤可呈剂量依赖性地抑制A549、HCC827细胞的活力和增殖活性，并可呈剂量依赖性地促进肺癌细胞凋亡，诱导细胞发生G₂/M期阻滞。经补中益气汤干预后，A549、HCC827细胞的迁移能力显著减弱。随着补中益气汤干预浓度的提高，A549细胞及HCC827细胞的VM逐渐减少。与对照组细胞相比，补中益气汤组细胞有765个差异表达基因，其中p-JNK和p-ERK1/2基因表达显著下调。Western blot检测结果显示，随着补中益气汤浓度的升高，A549、HCC827细胞中JNK/ERK1/2信号通路的磷酸化水平被逐渐抑制。补中益气汤可使小鼠肿瘤的体积和质量均显著减小，使肿瘤组织中细胞凋亡率升高，并使肿瘤组织中p-JNK、p-ERK1、p-ERK2表达降低和E-cadherin表达升高。结论 补中益气汤可能通过抑制JNK/ERK1/2信号通路活性，抑制肺癌细胞活性和血管生成。

关键词

肺癌 / 补中益气汤 / 抑癌 / 细胞活性 / 血管生成拟态