环状RNA SAMD8调控miR-223-3p/RHOB表达抑制胰腺导管腺癌进程的分子机制

摘要

目的 探讨环状RNA SAMD8(circ-SAMD8)在胰腺导管腺癌(PDAC)进展中的潜在机制。方法 基于Microarray数据(GSE79634)分析PDAC组织中circRNAs的表达谱。通过实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)验证circ-SAMD8(hsa＿circ＿0006148)在PDAC组织和细胞(CFPAC-1和PANC-1)中的表达。采用生物信息学分析预测circ-SAMD8的靶微小RNA(miRNA)及其下游mRNA,并采用双荧光素酶报告基因实验进行鉴定。采用MTT法和集落形成法检测PDAC细胞的增殖能力。采用免疫印迹法(Western blot)检测抗凋亡蛋白Bcl-2和促凋亡蛋白Bax的表达水平。采用流式细胞术检测凋亡细胞百分比。结果 circ-SAMD8在PDAC组织和细胞中的表达水平低于癌旁组织和正常细胞，差异有统计学意义(P<0.05)。过表达circ-SAMD8能有效促进PDAC细胞凋亡，抑制PDAC细胞增殖。双荧光素酶报告基因实验显示，miR-223-3p是circ-SAMD8的一个潜在相互作用分子，miR-223-3p的下游mRNA靶点是RHOB。miR-223-3p在PDAC组织和细胞中异常过表达，并伴有RHOB低表达。在转染miR-223-3p模拟物或sh-circ-SAMD8的PDAC细胞中，RHOB表达显著降低，增殖能力增强，凋亡率降低。结论 circ-SAMD8通过海绵化miR-223-3p,调控下游RHOB的表达，有效抑制PDAC的发生发展。

关键词

胰腺导管腺癌 / 环状RNA SAMD8 / 微小RNA-223-3p / RHOB基因 / 靶点 / 细胞增殖