利多卡因通过降低微小RNA-181a表达抑制缺氧/复氧诱导的心肌细胞损伤

摘要

目的 探讨利多卡因通过调控微小RNA-181a(miR-181a)对缺氧/复氧(H/R)诱导的心肌细胞H9C2损伤的影响。方法 培养H9C2细胞，建立H/R模型，作为H/R组；正常培养的细胞作为对照(Con)组。使用1.0、2.5、5.0、10.0、20.0μmol/L利多卡因处理H/R诱导的H9C2细胞，并分别设为1.0μmol/L组、2.5μmol/L组、5.0μmol/L组、10.0μmol/L组和20.0μmol/L组。将anti-miR-NC、anti-miR-181a分别转染至H/R诱导的H9C2细胞，记为H/R+anti-miR-NC组、H/R+anti-miR-181a组。将miR-NC、miR-181a分别转染至H/R诱导的H9C2细胞，再用20.0μmol/L利多卡因处理，分别记为H/R+miR-NC+20.0μmol/L组、H/R+miR-181a+20.0μmol/L组。采用MTT实验检测细胞活性；采用流式细胞术检测细胞凋亡；采用蛋白质印迹(Western blot)检测细胞半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白表达；采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测miR-181a表达；检测丙二醛(MDA)含量及乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)活性；采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测炎性因子[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)]的水平。结果 与Con组相比，H/R组细胞活性降低，差异有统计学意义(P<0.05)。与H/R组相比，5.0μmol/L组、10.0μmol/L组和20.0μmol/L组的细胞活性提高，差异有统计学意义(P<0.05)。因此，后续以20.0μmol/L利多卡因进行实验。与Con组相比，H/R组细胞凋亡率、Caspase-3蛋白表达升高，差异有统计学意义(P<0.05)。与H/R组相比，20.0μmol/L组细胞凋亡率、Caspase-3蛋白表达降低，差异有统计学意义(P<0.05)。与Con组相比，H/R组MDA含量、LDH活性以及炎症因子水平提高，SOD活性降低，差异有统计学意义(P<0.05);与H/R组相比，20.0μmol/L组MDA含量、LDH活性以及炎性因子水平降低，SOD活性提高，差异有统计学意义(P<0.05)。与H/R+anti-miR-NC组相比，H/R+anti-miR-181a组细胞miR-181a表达、凋亡率和Caspase-3蛋白表达降低，差异有统计学意义(P<0.05)。与H/R+anti-miR-NC组相比，H/R+anti-miR-181a组MDA含量、LDH活性以及炎性因子水平降低，SOD活性升高，差异有统计学意义(P<0.05)。与H/R+miR-NC+20.0μmol/L组相比，H/R+miR-181a+20.0μmol/L组细胞凋亡率、Caspase-3蛋白和MDA含量、LDH活性以及炎性因子水平升高，SOD活性降低，差异有统计学意义(P<0.05)。结论 利多卡因通过干扰miR-181a表达，抑制H/R诱导的心肌细胞H9C2损伤。

关键词

利多卡因 / 微小RNA-181a / 缺氧/复氧 / 凋亡 / 细胞损伤 / 心肌细胞