长链非编码RNA组蛋白去甲基化酶1同系物D反义RNA1靶向微小RNA-421对过氧化氢诱导的心肌细胞氧化损伤的影响

摘要

目的 探讨长链非编码RNA组蛋白去甲基化酶1同系物D反义RNA1（lncRNA JHDM1D-AS1）靶向微小RNA-421（miR-421）对过氧化氢（H₂O₂）诱导的心肌细胞（H9C2细胞）氧化损伤的影响。方法 将H9C2细胞分为对照（Con）组、H₂O₂组、H₂O₂+pcDNA组、H₂O₂+pcDNA-JHDM1D-AS1组、H₂O₂+anti-miR-NC组、H₂O₂+anti-miR-421组、H₂O₂+pcDNA-JHDM1D-AS1+miR-NC组、H₂O₂+pcDNA-JHDM1D-AS1+miR-421组。采用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）检测JHDM1D-AS1和miR-421表达。采用比色法测定H9C2细胞中超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）水平以及培养液中乳酸脱氢酶（LDH）水平。采用流式细胞术评估H9C2细胞凋亡率。JHDM1D-AS1和miR-421的靶向关系通过双荧光素酶报告基因法验证。结果 与Con组比较，H₂O₂组H9C2细胞JHDM1D-AS1水平、SOD活性降低，MDA水平、LDH水平、细胞凋亡率、miR-421水平升高，差异均有统计学意义（P<0.05）。与H₂O₂+pcDNA组比较，H₂O₂+pcDNA-JHDM1D-AS1组H9C2细胞SOD活性升高，miR-421表达水平、MDA水平、LDH水平、细胞凋亡率降低，差异有统计学意义（P<0.05）。与H₂O₂+anti-miR-NC组比较，H₂O₂+anti-miR-421组H9C2细胞SOD活性升高，MDA水平、LDH水平、细胞凋亡率降低，差异有统计学意义（P<0.05）。miR-421是JHDM1D-AS1的靶基因。与H₂O₂+pcDNA-JHDM1D-AS1+miR-NC组比较，H₂O₂+pcDNA-JHDM1D-AS1+miR-421组H9C2细胞SOD活性降低，MDA水平、LDH水平、细胞凋亡率升高，差异有统计学意义（P<0.05）。结论 lncRNA JHDM1D-AS1通过靶向下调miR-421表达抑制细胞凋亡和氧化应激，减轻H₂O₂诱导的心肌细胞氧化损伤。

关键词

长链非编码RNA / 组蛋白去甲基化酶1同系物D反义RNA1 / 微小RNA-421 / 过氧化氢 / 心肌细胞 / 细胞凋亡 / 氧化应激反应

基金资助

江苏省淮安市自然科学研究计划项目(HAB202025)