瑞马唑仑对大鼠视网膜缺血再灌注损伤的作用及机制研究

摘要

目的 探讨瑞马唑仑(Rem)对大鼠视网膜缺血再灌注损伤(RIRI)的作用及其对高迁移率族蛋白B1(HMGB1)/晚期糖基化终末产物受体(RAGE)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路的调控机制。方法 将大鼠随机分为假手术组(Sham组)、模型组(Model组)、低剂量Rem组(Rem-L组)、中剂量Rem组(Rem-M组)、高剂量Rem组(Rem-H组)和高剂量Rem加HMGB1激活剂地塞米松(DEX)组(Rem-H+DEX组),每组15只。除Sham组外，其他各组大鼠均通过升高眼压法构建RIRI模型。采用苏木素-伊红(HE)染色法观察各组大鼠视网膜组织结构变化；采用TUNEL法检测视网膜组织细胞凋亡情况；采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测各组大鼠血清白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)表达水平；使用试剂盒检测氧化应激指标[超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、丙二醛(MDA)]水平；采用蛋白质印迹法(Western blot)检测视网膜组织中缺氧相关因子[缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)]及HMGB1/RAGE/NF-κB信号通路相关蛋白表达水平。结果 相较于Sham组，Model组大鼠视网膜高度水肿，神经节细胞数量显著减少，细胞呈现空泡样变化且排列紊乱，细胞间隙增宽；随着Rem注射剂量的增加，RIRI大鼠视网膜水肿程度逐渐减轻，神经节细胞数量增多，排列更加有序。相较于Sham组，Model组大鼠视网膜细胞凋亡率和血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平及视网膜组织中MDA、HMGB1、RAGE、NF-κB、HIF-1α、VEGF表达水平均升高，而SOD、GSH-PX表达水平降低，差异有统计学意义(P<0.05);相较于Model组，Rem-L组、Rem-M组和Rem-H组大鼠视网膜细胞凋亡率和血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平及视网膜组织中MDA、HMGB1、RAGE、NF-κB、HIF-1α、VEGF表达水平呈剂量依赖性降低，而SOD、GSH-PX表达水平呈剂量依赖性升高，差异有统计学意义(P<0.05);相较于Rem-H组，Rem-H+DEX组上述指标变化趋势逆转。结论 Rem能够抑制大鼠RIRI的发生，其作用机制可能与调控HMGB1/RAGE/NF-κB信号通路有关。

关键词

视网膜缺血再灌注损伤 / 瑞马唑仑 / 高迁移率族蛋白B1 / 晚期糖基化终末产物受体 / 核转录因子-κB / 信号通路