电针联合丹参酮ⅡA经Hippo信号通路改善脑缺血再灌注损伤大鼠神经细胞凋亡的机制研究

摘要

目的 探讨电针(EA)联合丹参酮ⅡA(TanⅡA)对脑缺血再灌注(I/R)损伤大鼠的神经保护作用及相关机制。方法 采用改良Longa线栓法制备脑I/R大鼠模型，并将其随机分为模型组(Model组)、电针组(EA组)、TanⅡA组和针药组(EA+TanⅡA组),每组16只。Sham组(n=16)大鼠仅暴露并游离颈动脉。采用神经功能缺损评分和Morris水迷宫测试评估大鼠的神经功能损伤和认知功能。采用2, 3, 5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色评估脑梗死体积。采用苏木精-伊红(HE)染色和TUNEL染色评估海马组织神经元损伤。采用蛋白免疫印迹检测凋亡相关蛋白和Hippo信号通路相关蛋白。结果 与Sham组比较，Model组大鼠神经功能缺损评分、脑梗死面积百分比、获得性训练期间的逃避潜伏期，以及脑组织TUNEL阳性染色细胞比例、Caspase-3活性、Cleaved Caspase-3蛋白和Bax蛋白表达均升高，而探索训练期间的目标象限停留时间和60 s内穿过平台次数，以及Bcl-2蛋白、Yes相关蛋白(YAP)和含PDZ结合基序的转录共激活因子(TAZ)蛋白表达均降低，差异有统计学意义(P<0.05)。与Model组比较，EA组、TanⅡA组和EA+TanⅡA组神经功能缺损评分、脑梗死体积百分比、获得性训练期间的逃避潜伏期、探索训练期间的目标象限停留时间和60 s内穿过平台次数，以及脑组织TUNEL阳性染色细胞比例、Caspase-3活性、Cleaved Caspase-3蛋白和Bax蛋白表达均降低，且EA+TanⅡA组低于EA组和TanⅡA组，差异均有统计学意义(P<0.05)。与Model组比较，EA组、TanⅡA组和EA+TanⅡA组Bcl-2、YAP和TAZ蛋白表达增加，且EA+TanⅡA组蛋白表达水平高于EA组和TanⅡA组，差异有统计学意义(P<0.05)。结论 电针与TanⅡA联合治疗脑I/R损伤能够协同增效，其机制可能与抑制Hippo通路活性有关。

关键词

大鼠 / 脑缺血再灌注 / 神经细胞凋亡 / 电针 / 丹参酮ⅡA / Yes相关蛋白 / 含PDZ结合基序的转录共激活因子 / 信号通路