基于Ras同源基因家族成员A/p38丝裂原活化蛋白激酶信号通路探讨川芎素改善化疗所致神经病理性疼痛的作用机制

摘要

目的 探讨川芎素(LC)通过调节Ras同源基因家族成员A(RhoA)/p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信号通路改善化疗所致神经病理性疼痛(CINP)的作用机制。方法 将60只SD大鼠随机分为5组：对照组(Con组)、模型组(Model组)、低剂量LC组(L-LC组)、高剂量LC组(H-LC组)和高剂量LC+溶血磷脂酸组(H-LC+LPA组),每组12只。对大鼠进行疼痛行为学检测。采用苏木精-伊红染色观察神经元病变。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-10(IL-10)的水平。采用蛋白质免疫印迹法(Western Blot)检测凋亡、自噬及RhoA/p38MAPK信号通路相关蛋白的表达水平。采用TUNEL检测脊髓背角组织凋亡水平。结果 术后3、5、7 d, Model组机械缩足阈值(MWT)、热缩足潜伏期(TWT)低于Con组，L-LC组和H-LC组MWT和TWT高于Model组，H-LC组MWT和TWT高于L-LC组比较，H-LC+LPA组MWT和TWT低于H-LC组比较，差异均有统计学意义(P<0.05)。与Con组比较，Model组IL-10、SOD、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、自噬相关蛋白(Beclin-1)、BNIP蛋白表达水平、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ降低，TNF-α、IL-1β、ROS、MDA水平、Caspase-1、Bax、RhoA、磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(P-p38MAPK)/p38MAPK蛋白表达水平和凋亡率增加，差异有统计学意义(P<0.05);与Model组比较，L-LC组和H-LC组IL-10、SOD、Bcl-2、Beclin-1、BNIP蛋白表达水平、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ增加，而TNF-α、IL-1β、ROS、MDA水平、Caspase-1、Bax、RhoA、P-p38MAPK/p38MAPK蛋白表达水平和凋亡率降低，差异有统计学意义(P<0.05),并呈剂量依赖性。与H-LC组比较，H-LC+LPA组MWT、TWT、IL-10、SOD、Bcl-2、Beclin-1、BNIP蛋白表达水平、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ降低，TNF-α、IL-1β、ROS、MDA水平、Caspase-1、Bax、RhoA、P-p38MAPK/p38MAPK蛋白表达水平和凋亡率增加，差异有统计学意义(P<0.05)。结论 LC可能是通过抑制RhoA/p38MAPK信号通路进而抑制氧化应激、神经炎症和凋亡，并促进自噬过程，减轻CINP大鼠的神经病理性疾病症状。

关键词

川芎素 / Ras同源基因家族成员A / p38丝裂原活化蛋白激酶 / 化疗 / 神经病理性疼痛 / 凋亡 / 自噬 / 丙二醛