桑杏止咳方对咳嗽变异性哮喘大鼠的影响及其可能机制研究

摘要

目的 基于环磷酸腺苷(cAMP)/囊性纤维化跨膜传导调节因子(CFTR)通路探讨桑杏止咳方对咳嗽变异性哮喘(CVA)大鼠的影响及可能机制。方法 采用随机数字表法将SD大鼠分为对照组、模型组、地塞米松组(0.5 mg/kg)和桑杏止咳方低、中、高剂量组(9.6、19.2、38.4 g/kg),每组9只。除对照组外，其余各组均建立CVA大鼠模型。各组大鼠灌胃给药，1次/d,持续14 d。观察各组大鼠一般状况；采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测大鼠血清白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-18(IL-18)水平；分别采用苏木素-伊红(HE)染色法和过碘酸-雪夫(PAS)染色法观察大鼠肺组织和支气管组织病理变化，并测定气道表面液体(ASL)酸碱度；采用蛋白质印迹法(Western blot)及实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测大鼠肺组织蛋白激酶A(PKA)、CFTR蛋白及其mRNA表达水平。结果 与对照组比较，模型组大鼠精神萎靡、毛色晦暗，体质量增长缓慢，肺泡间隔实变区域面积显著扩大，支气管周围有大量炎性细胞浸润；与模型组比较，各干预组大鼠一般状况更佳，肺组织及支气管腔内炎性浸润减轻。与对照组比较，模型组血清IL-1β、IL-18水平升高，模型组、桑杏止咳方低剂量组、桑杏止咳方中剂量组、桑杏止咳方高剂量组ASL的pH值均降低，差异有统计学意义(P<0.05);与模型组比较，各干预组血清IL-1β、IL-18水平降低，地塞米松组、桑杏止咳方中剂量组、桑杏止咳方高剂量组ASL的pH值升高，差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较，模型组、桑杏止咳方低剂量组、桑杏止咳方中剂量组PKA蛋白及PKA mRNA表达均降低，模型组和各干预组CFTR蛋白和CFTR mRNA表达均降低，差异有统计学意义(P<0.05);与模型组比较，地塞米松组、桑杏止咳方高剂量组PKA蛋白及PKA mRNA表达均升高，桑杏止咳方高剂量组CFTR蛋白及CFTR mRNA表达均升高，差异有统计学意义(P<0.05)。结论 桑杏止咳方可改善CVA大鼠一般状况，调节ASL酸碱平衡，减轻气道炎症细胞浸润和气道重塑，降低炎症因子IL-1β、IL-18水平，其机制可能与cAMP/CFTR通路有关。

关键词

桑杏止咳方 / 咳嗽变异性哮喘 / 环磷酸腺苷 / 囊性纤维化跨膜传导调节因子 / 气道表面液体 / 蛋白激酶A / 炎症细胞浸润 / 气道重塑

基金资助

国家自然科学基金资助项目(82060794); 新疆维吾尔自治区自然科学基金杰出青年科学基金资助项目(2022D01E80)