环泊酚对帕金森病大鼠的保护作用及调控机制研究

摘要

目的 基于腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/沉默信息调节因子1(SIRT1)/过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1α(PGC1α)信号通路，探讨环泊酚对帕金森病(PD)大鼠的保护作用及调控机制。方法 将Wistar大鼠分为空白对照组、模型组、环泊酚组、环泊酚+AMPK抑制剂dorsomorphin组(环泊酚+Dor组),每组10只。除空白对照组外，其余3组构建PD模型。采用行为学实验评估各组大鼠运动功能和认知功能，采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测脑纹状体多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT)水平，采用免疫荧光染色实验检测脑黑质酪氨酸羟化酶(TH)水平，采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测脑纹状体ULK1、beclin1、LC3、Bcl-2、Bax mRNA相对表达量，采用蛋白质印迹法(Western blot)检测脑纹状体ULK1、beclin1、Bcl-2、Bax、磷酸化(p)-AMPK、SIRT1、PGC1α蛋白相对表达量和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ。结果 相较于空白对照组，模型组大鼠运动功能和认知功能下降，脑纹状体DA、5-HT水平降低，脑黑质TH荧光强度减弱，脑纹状体ULK1、beclin1、LC3、Bcl-2 mRNA和ULK1、beclin1、Bcl-2、p-AMPK、SIRT1、PGC1α蛋白相对表达量及LC3Ⅱ/LC3Ⅰ降低，Bax mRNA及Bax蛋白相对表达量升高，差异有统计学意义(P<0.05);相较于模型组，环泊酚组大鼠运动功能、认知功能改善，脑纹状体DA、5-HT水平升高，脑黑质TH荧光强度增强，脑纹状体ULK1、beclin1、LC3、Bcl-2 mRNA和ULK1、beclin1、Bcl-2、p-AMPK、SIRT1、PGC1α蛋白相对表达量及LC3Ⅱ/LC3Ⅰ升高，Bax mRNA及Bax蛋白相对表达量降低，差异有统计学意义(P<0.05);环泊酚+Dor组与环泊酚组比较结果显示，AMPK抑制剂dorsomorphin可逆转环泊酚的作用，差异有统计学意义(P<0.05)。结论 环泊酚可能通过激活AMPK/SIRT1/PGC1α信号通路促进自噬，对PD大鼠发挥神经保护作用。

关键词

环泊酚 / 帕金森病 / 腺苷酸活化蛋白激酶 / 沉默信息调节因子1 / 自噬 / 运动功能 / 认知功能 / 过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1α