龙脷叶水提物通过水通道蛋白3/蛋白激酶B通路改善便秘的作用研究

摘要

目的 基于网络药理学分析和实验探讨龙脷叶水提物治疗便秘的疗效及机制。方法 采用在线平台进行网络药理学分析，探讨龙脷叶治疗便秘的分子机制。构建洛哌丁胺诱导的小鼠便秘模型和肠上皮细胞(IEC)损伤模型。采用首次排黑便时间、粪便含水量和胃肠道传输率等指标评估疗效。采用Annexin V-FITC染色评估细胞凋亡情况，JC-1染色检测线粒体膜电位，化学发光法测定三磷酸腺苷(ATP)水平，蛋白质印迹检测相关蛋白表达。结果 网络药理学分析显示，龙脷叶中的29种活性成分作用于19个与便秘相关的基因，其中AKT1为关键基因之一。实验结果表明，龙脷叶水提物能有效缓解洛哌丁胺诱导的小鼠便秘症状，包括体质量减轻、肠蠕动减缓、排便时间延长和粪便含水量降低；此外，龙脷叶水提物能抑制IEC-6细胞凋亡，恢复线粒体膜电位，并维持细胞内ATP水平。龙脷叶水提物的治疗机制涉及下调Bcl-2相关X蛋白(Bax)、细胞色素C、裂解的半胱天冬酶-3(Cleaved-Caspase3)和水通道蛋白3(AQP3)的表达，以及增强蛋白激酶B(Akt)磷酸化。结论 龙脷叶水提物可有效改善模型小鼠的便秘症状，其机制可能与改善肠道细胞能量代谢、抑制IEC凋亡以及降低AQP3表达有关，提示龙脷叶可作为一种临床治疗便秘的潜在药物。

关键词

龙脷叶水提物 / 便秘 / 水通道蛋白 / 蛋白激酶B / 肠上皮细胞 / 线粒体膜电位 / 网络药理学 / 洛哌丁胺