CXC趋化因子配体5通过激活Wnt/β-连环蛋白通路促进胃癌免疫逃逸及移植瘤生长的机制研究

摘要

目的 探讨CXC趋化因子配体5（CXCL5）通过Wnt/β-连环蛋白（Wnt/β-catenin）信号通路对胃癌细胞小鼠移植瘤生长的影响。方法 选取70例胃癌（GC）患者（GC组）和70例健康人群（健康组）为研究对象，检测各组血清CXCL5水平，采用免疫组织化学染色法检测GC组织中CXCL5的阳性表达率，并分析CXCL5表达与临床病理特征的关系。将40只小鼠分为过表达CXCL5组和对照组，每组20只。取小鼠胃癌细胞株MFC,通过稳定过表达CXCL5和转染空载体建立小鼠移植瘤模型，记录各组小鼠移植瘤的生长情况及小鼠存活情况。采用流式细胞术检测小鼠移植瘤组织中CD4⁺T淋巴细胞、CD8⁺T淋巴细胞、调节性T细胞（Treg细胞）比例；采用Western blot法检测小鼠移植瘤组织中CXCL5及Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白的表达；采用实时荧光定量聚合酶链反应（RT-qPCR）检测各组小鼠移植瘤组织中细胞周期蛋白D1（Cyclin D1）和原癌基因c-Myc（c-Myc）的mRNA表达。结果 GC组血清CXCL5水平高于健康组，差异有统计学意义（P<0.05）。GC组织中CXCL5阳性表达率为67.14%（47/70）,高于癌旁组织中的CXCL5阳性表达率35.71%（25/70）,差异有统计学意义（P<0.05）。GC患者CXCL5阳性表达与阴性表达在肿瘤分化程度、TNM分期及淋巴结转移方面比较，差异有统计学意义（P<0.05）。过表达CXCL5组小鼠存活率低于对照组，差异有统计学意义（P=0.048）;随着时间延长，过表达CXCL5组小鼠肿瘤体积大于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。过表达CXCL5组小鼠肿瘤组织中CXCL5、Wnt1、Wnt2、β-catenin蛋白表达均高于对照组小鼠，差异有统计学意义（P<0.05）。过表达CXCL5组小鼠肿瘤组织中CD4⁺T细胞、CD8⁺T细胞比例低于对照组，Treg细胞比例高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。过表达CXCL5组小鼠肿瘤组织中Cyclin D1 mRNA和c-Myc mRNA表达高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。结论 GC患者癌组织和血清中CXCL5表达水平上调，CXCL5异常高表达可能激活Wnt/β-catenin信号通路影响肿瘤免疫活性，促进GC进展。

关键词

胃癌 / CXC趋化因子配体5 / Wnt/β-连环蛋白 / 肿瘤免疫 / Treg细胞 / 靶向治疗 / 肿瘤微环境 / 细胞周期蛋白D1

基金资助

国家自然科学基金项目(31700737)