circSKA3/微小RNA-532-5p对卵巢癌细胞增殖、迁移及凋亡的影响

摘要

目的 探讨circSKA3对卵巢癌细胞恶性行为的影响及其可能作用机制。方法 体外培养人卵巢癌细胞SK-OV-3,随机分为si-NC组、si-circSKA3组、微小RNA(miR)-NC组、miR-532-5p组、si-circSKA3+anti-miR-NC组和si-circSKA3+anti-miR-532-5p组。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测circSKA3、miR-532-5p的表达量。采用CCK-8法、平板克隆形成实验、流式细胞术、Transwell实验分别检测细胞增殖、凋亡及迁移。采用双荧光素酶报告实验检测circSKA3与miR-532-5p的靶向关系。采用蛋白免疫印迹(Western blot)检测Cleaved-caspase3蛋白表达量。结果 卵巢癌组织中的circSKA3表达水平高于癌旁正常卵巢组织，差异有统计学意义(P<0.05)。卵巢癌组织中的miR-532-5p表达低于癌旁正常卵巢组织，差异有统计学意义(P<0.05)。与si-NC组比较，si-circSKA3组的circSKA3表达减少，miR-532-5p表达增加，细胞增殖抑制率、细胞凋亡率升高，细胞克隆形成数和迁移细胞数减少，且Cleaved-caspase3蛋白表达升高，差异有统计学意义(P<0.05)。circSKA3能够靶向结合miR-532-5p。miR-532-5p模拟物转染后，细胞增殖、细胞迁移抑制，细胞增殖抑制率、细胞凋亡率以及Cleaved-caspase3蛋白水平升高，差异有统计学意义(P<0.05)。与单独转染circSKA3小干扰RNA比较，同时转染circSKA3小干扰RNA和miR-532-5p抑制剂能够促进细胞增殖和迁移，抑制细胞凋亡率，降低Cleaved-caspase3蛋白表达，差异有统计学意义(P<0.05)。结论 沉默circSKA3可上调miR-532-5p表达，进而抑制卵巢癌细胞的恶性发展。

关键词

卵巢癌 / circSKA3 / 微小RNA-532-5p / 细胞增殖 / 细胞迁移 / 细胞凋亡 / Cleaved-caspase3蛋白 / 实时荧光定量聚合酶链反应