piRNA-33195沉默调控急性髓系白血病CDKN2B基因甲基化的研究

摘要

目的 探讨Piwi相互作用RNA(piRNA)-33195沉默对急性髓系白血病(AML)中细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂2B(CDKN2B)基因启动子区甲基化状态的影响。方法 收集30例缺铁性贫血患者(对照组)和30例AML患者(疾病组)的骨髓液样本，分离单个核细胞。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测2组细胞中piRNA-33195和CDKN2B表达水平，并采用甲基化特异性聚合酶链式反应(MSP)检测CDKN2B基因启动子区甲基化水平。将antagomiR-NC(阴性对照)和antagomiR-piRNA-33195(piRNA-33195特异性抑制剂)分别转染至AML患者骨髓单个核细胞，转染48 h后，采用qRT-PCR和MSP分别检测CDKN2B mRNA表达及启动子区甲基化水平变化。结果 疾病组骨髓单个核细胞中piRNA-33195相对表达量高于对照组，CDKN2B mRNA相对表达量低于对照组，差异有统计学意义(P<0.001);疾病组CDKN2B甲基化水平高于对照组，差异有统计学意义(P<0.001)。piRNA-33195沉默后，CDKN2B相对表达水平高于沉默前，CDKN2B甲基化水平低于沉默前，差异有统计学意义(P<0.001)。结论 piRNA-33195在AML中呈高表达状态，且与CDKN2B低表达及高甲基化密切相关。沉默piRNA-33195可降低AML患者骨髓单个核细胞中CDKN2B基因启动子区的甲基化水平，并上调CDKN2B mRNA表达。

关键词

急性髓系白血病 / Piwi相互作用RNA-33195 / DNA甲基化 / 细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂2B / 基因表达调控 / 骨髓单个核细胞 / 表观遗传学 / 生物标志物

基金资助

北京医工健康公益基金会医学科学研究基金项目(YWJKJJHKYJJ-BQ-24007)